FFPE နမူနာများထံမှ FFPE DNA ခွဲထုတ်ခြင်းကိရိယာ DNA ထုတ်ယူခြင်း သန့်စင်ရေးကိရိယာ
Kit ဖော်ပြချက်-
paran အပိုင်းများနှင့် paraffin blocks များကဲ့သို့သော paran-embedded တစ်ရှူးများမှ အရည်အသွေးမြင့် မျိုးဗီဇ DNA ကို လျင်မြန်စွာ သန့်စင်ပါ။
◮RNase ညစ်ညမ်းမှု မရှိပါ-အစုံလိုက်မှ ပံ့ပိုးပေးသော DNA-Only Column သည် စမ်းသပ်မှုအတွင်း RNase ကို မထည့်ဘဲ မျိုးရိုးဗီဇ DNA မှ RNA ကို ဖယ်ရှားနိုင်စေပြီး ဓာတ်ခွဲခန်းအား exogenous RNase မှ ညစ်ညမ်းခြင်းမှ ကာကွယ်ပေးပါသည်။
◮မြန်သောအမြန်နှုန်း-Foregene Protease သည် အလားတူ ပရိုတိန်းများထက် လုပ်ဆောင်ချက် ပိုမိုမြင့်မားပြီး တစ်ရှူးနမူနာများကို လျင်မြန်စွာ ချေဖျက်ပေးသည်။လုပ်ဆောင်ချက်သည် ရိုးရှင်းပြီး မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူသည့် လုပ်ဆောင်ချက်ကို မိနစ် 20 မှ 80 အတွင်း ပြီးမြောက်နိုင်သည်။
◮အဆင်ပြေသည်-အာရုံစူးစိုက်မှုအား အခန်းအပူချိန်တွင် လုပ်ဆောင်ပြီး 4°C အပူချိန်နိမ့်သော အာရုံစူးစိုက်မှု သို့မဟုတ် DNA ၏ အီသနောမိုးရွာသွန်းမှုအတွက် မလိုအပ်ပါ။
◮ဘေးကင်းရေး-အော်ဂဲနစ် ဓာတ်ပစ္စည်းများ ထုတ်ယူရန် မလိုအပ်ပါ။
◮အရည်အသွေးမြင့်မားသော:ထုတ်ယူထားသော မျိုးရိုးဗီဇ DNA တွင် ကြီးမားသောအပိုင်းအစများ၊ RNA မရှိ၊ RNase မရှိ၊ နှင့် အိုင်းယွန်းပါဝင်မှု အလွန်နည်းပါးပြီး စမ်းသပ်မှုအမျိုးမျိုး၏ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။
◮Micro-elution စနစ်-၎င်းသည် ရေအောက်ပိုင်း ရှာဖွေတွေ့ရှိခြင်း သို့မဟုတ် စမ်းသပ်မှုများအတွက် အဆင်ပြေသည့် မျိုးဗီဇ DNA ၏ အာရုံစူးစိုက်မှုကို တိုးမြှင့်နိုင်သည်။
ဖော်ပြချက်
ဤကိရိယာသည် ဖော်မယ်လ်ဒီဟိုက်ပုံသေတစ်ရှူး သို့မဟုတ် ပါရာဖင်-မြှုပ်ထားသော တစ်ရှူးများမှ အရည်အသွေးမြင့် မျိုးဗီဇ DNA ကို ထုတ်ယူရန်နှင့် သန့်စင်ရန် ရည်ရွယ်ပါသည်။
Paraffin-embedded နမူနာ၏ genomic DNA သည် သိုလှောင်ချိန် သို့မဟုတ် ပတ်ဝန်းကျင်ကြောင့် ပျက်စီးသွားမည်ဖြစ်ပြီး genomic DNA ကို ထုတ်ယူရန်ခက်ခဲစေသည်။ဤကိရိယာသည် မြင့်မားသောထုတ်ယူမှုအောင်မြင်မှုနှုန်းဖြင့် paraffin-embedded နမူနာများမှ မျိုးရိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူရန်အတွက် သင့်လျော်သော သီးသန့်ပြုပြင်ထားသော ဖော်မြူလာကို လက်ခံပါသည်။လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုလုံးသည် အဆိပ်သင့်သော ဖီနော၊ ကလိုရိုဖောင် သို့မဟုတ် isopropanol မိုးရွာသွန်းမှုကို အသုံးပြုရန် မလိုအပ်ပါ။
ဤကိရိယာသည် DNA၊ အသစ်စက်စက် Foregene Protease Plus နှင့် အထူးသီးသန့် ချည်နှောင်နိုင်သည့် အရည်အသွေးမြင့် paraffin-embedded တစ်ရှူးများကို 2-5 နာရီအတွင်း ထုတ်ယူနိုင်သည့် အရည်အသွေးမြင့် Paraffin-embedded တစ်ရှူးမျိုးရိုးဗီဇ DNA ကို 2-5 နာရီအတွင်း ထုတ်ယူနိုင်သည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၅၀၊ ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၁၀၀၊ ပြင်ဆင်မှု ၂၅၀
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
| ကြားခံ FL1 |
| ကြားခံ FL2* |
| Buffer PW* |
| ကြားခံ WB |
| ကြားခံ EB |
| Foregene Protease Plus |
| DNA သီးသန့်ကော်လံ |
| ညွှန်ကြားချက်များ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
- RNase ညစ်ညမ်းမှုမရှိခြင်း- အစုံလိုက်မှပေးသော DNA-Only Column သည် စမ်းသပ်မှုအတွင်း RNase ကိုထည့်သွင်းခြင်းမပြုဘဲ မျိုးရိုးဗီဇ DNA မှ RNA ကို ဖယ်ရှားနိုင်စေပြီး ဓာတ်ခွဲခန်းတွင် exogenous RNase ညစ်ညမ်းခြင်းမှရှောင်ကြဉ်ပါ။
- မြန်ဆန်သောအမြန်နှုန်း- Foregene Protease Plus သည် အလားတူ ပရိုတင်းများထက် လုပ်ဆောင်ချက်ပိုမိုမြင့်မားပြီး တစ်ရှူးနမူနာများကို အစာချေဖျက်မှု ပိုမိုမြန်ဆန်စေသည်။လုပ်ဆောင်ချက်သည် ရိုးရှင်းပြီး မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူခြင်း လုပ်ဆောင်ချက်ကို 2-5 နာရီအတွင်း ပြီးမြောက်နိုင်ပါသည်။
- အဆင်ပြေမှု- အခန်းအပူချိန်တွင် centrifugation ကို လုပ်ဆောင်ပြီး 4 စက်အတွက် မလိုအပ်ပါ။°C သည် DNA ၏ အပူချိန်နိမ့်ကျမှု သို့မဟုတ် အီသနောမိုးရွာသွန်းမှု။
- လုံခြုံစိတ်ချရမှု- အော်ဂဲနစ်ဓာတ်ပစ္စည်းများထုတ်ယူရန်မလိုအပ်ပါ။
- အရည်အသွေးမြင့်- ထုတ်ယူထားသော မျိုးရိုးဗီဇ DNA အပိုင်းအစများသည် ကြီးမားသည်၊ RNA မရှိ၊ RNase မရှိ၊ နှင့် စမ်းသပ်မှုအမျိုးမျိုး၏ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည့် အလွန်နည်းသော အိုင်းယွန်းပါဝင်မှု။
Kit လျှောက်လွှာ
၎င်းသည် formaldehyde-fixed နမူနာများနှင့် paraffin-embedded tissue နမူနာများမှ မျိုးဗီဇ DNA ကို ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းအတွက် သင့်လျော်သည်။
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
- ဤကိရိယာကို အခန်းအပူချိန် (၁၅-၂၅ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင်) ခြောက်သွေ့သောအခြေအနေအောက်တွင် ၁၂ လကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။အချိန်ပိုကြာအောင် သိမ်းဆည်းလိုပါက 2-8°C တွင် သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။
မှတ်ချက်- အပူချိန်နိမ့်သောနေရာတွင် သိမ်းဆည်းထားပါက၊ အဆိုပါဖြေရှင်းချက်သည် မိုးရွာနိုင်ခြေရှိသည်။အသုံးမပြုမီ၊ အခန်းအပူချိန်တွင် အချိန်အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ ဖြေရှင်းချက်ထည့်ရန် သေချာပါစေ။လိုအပ်ပါက မိုးရေပျော်စေရန် 37°C ရေချိုးခန်းတွင် ၁၀ မိနစ်ခန့် ကြိုတင်အပူပေးပြီး အသုံးမပြုမီ ရောမွှေပါ။
-Foregene Protease Plus ဖြေရှင်းချက်တွင် အခန်းအပူချိန်တွင် အကြာကြီးသိမ်းဆည်းထားသောအခါ (၃ လ) တွင် ထူးခြားသော ဖော်မြူလာတစ်ခုပါရှိသည်။4°C တွင် သိမ်းဆည်းသောအခါ ပိုမိုတက်ကြွပြီး တည်ငြိမ်သောကြောင့် 4°C တွင် သိမ်းဆည်းရန် အကြံပြုထားပြီး -20°C တွင် မသိမ်းဆည်းရန် သတိပြုပါ။
