ရေအတွက် DNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာ DNA ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သန့်စင်ခြင်းကိရိယာ
သတ်မှတ်ချက်များ
ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၅၀
-Lysozyme သည် အပြုသဘောဆောင်သောဘက်တီးရီးယားများ၏ ဆဲလ်နံရံကို အင်ဇိုင်းဖြင့် ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေသည်။
-Buffer TE- 100mg/ml Lysozyme solution ကိုပြင်ဆင်ပြီး lysozyme enzymatic hydrolysis ပတ်ဝန်းကျင်ကို ပံ့ပိုးရန်အသုံးပြုသည်။
-Buffer SG1 နှင့် Buffer SG2- နမူနာ ပရိုတိန်း အစာခြေသည့် ပတ်ဝန်းကျင်ကို ပံ့ပိုးပေးသည်။
-Foregene Protease- မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်လွှတ်ရန်အတွက် ပရိုတိန်းအင်ဇိုင်းပတ်ဝန်းကျင်တွင် အင်ဇိုင်းနမူနာများကို ဟိုက်ဒရောလစ်ဖြစ်စေသည်။
-Buffer SG3- Foregene Protease ကို ပိတ်ပြီး DNA တင်သည့် ပတ်ဝန်းကျင်ကို ပံ့ပိုးပေးသည်။
-Buffer SG4- DNA loading ပတ်ဝန်းကျင်ကို ပံ့ပိုးပေးသည့် ဖြည့်စွက်။
-Buffer PW- DNA ရှိ ပရိုတင်းနှင့် RNA ကဲ့သို့သော အညစ်အကြေးများကို ဖယ်ရှားပါ။
-Buffer WB- DNA တွင်ကျန်ရှိသောဆားအိုင်းယွန်းများကိုဖယ်ရှားပါ။
-Buffer EB- သန့်စင်သောကော်လံအမြှေးပါးပေါ်ရှိ DNA ကို ထုတ်ဖော်ပြောဆိုသည်။
-DNA သီးသန့်ကော်လံ- အထူးသဖြင့် lysate အတွင်းရှိ မျိုးရိုးဗီဇ DNA ကို စုပ်ယူသည်။
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
ကြားခံ SG1 |
ကြားခံ SG2 |
ကြားခံ SG3 |
ကြားခံ SG4 |
Buffer PW |
ကြားခံ WB |
ကြားခံ EB |
ကြားခံ TE |
Foregene Protease |
Lysozyme |
DNA သီးသန့်ကော်လံ |
ညွှန်ကြားချက်များ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
- RNase ညစ်ညမ်းမှုမရှိခြင်း- အစုံလိုက်မှပေးသော DNA-Only Column သည် စမ်းသပ်မှုအတွင်း ထပ်လောင်း RNase မလိုအပ်ဘဲ မျိုးရိုးဗီဇ DNA မှ RNA ကို ဖယ်ရှားနိုင်စေပြီး ဓာတ်ခွဲခန်းတွင် exogenous RNase ကြောင့် ညစ်ညမ်းခြင်းမှ ကင်းဝေးစေပါသည်။
- မြန်ဆန်သော မြန်နှုန်း- လုပ်ဆောင်ချက်သည် ရိုးရှင်းပြီး ရေတွင် မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူခြင်း လုပ်ဆောင်ချက်ကို မိနစ် ၄၀ အတွင်း ပြီးမြောက်နိုင်ပါသည်။
-အဆင်ပြေသည်- အခန်းအပူချိန်တွင် centrifugation ကိုလုပ်ဆောင်ပြီး 4°C အပူချိန်နိမ့်သော centrifugation သို့မဟုတ် DNA ၏ အီသနောမိုးရွာသွန်းမှုအတွက် မလိုအပ်ပါ။
- လုံခြုံစိတ်ချရမှု- အော်ဂဲနစ်ဓာတ်ပစ္စည်းများ ထုတ်ယူရန် မလိုအပ်ပါ။
- အရည်အသွေးမြင့်- ထုတ်ယူထားသော မျိုးရိုးဗီဇ DNA အပိုင်းအစများသည် ကြီးမားသည်၊ RNA မရှိ၊ RNase မရှိ၊ နှင့် စမ်းသပ်မှုအမျိုးမျိုး၏ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည့် အလွန်နည်းသော အိုင်းယွန်းပါဝင်မှု။
Kit လျှောက်လွှာ
၎င်းသည် အောက်ပါနမူနာများ၏ မျိုးဗီဇ DNA ကို သန့်စင်ရန်အတွက် သင့်လျော်သည်- ငါးပုစွန်ကန်ရေ၊ ကန်ရေ၊ ပုတ်ရေ၊ ကန်ရေ၊ မြစ်ရေ၊ ကြာကန်ရေနှင့် အခြားနမူနာများ။
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
- ဤကိရိယာကို အခန်းအပူချိန် (၁၅-၂၅ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်) တွင် ခြောက်သွေ့သောအခြေအနေတွင် ၁၂ လကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်ပြီး အချိန်ကြာမြင့်စွာ သိမ်းဆည်းလိုပါက 2-8 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင် သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။
မှတ်ချက်- အပူချိန်နိမ့်သောနေရာတွင် သိမ်းဆည်းထားပါက၊ အဆိုပါဖြေရှင်းချက်သည် မိုးရွာနိုင်ခြေရှိသည်။အသုံးမပြုမီ၊ အခန်းအပူချိန်တွင် အချိန်အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ ဖြေရှင်းချက်ထည့်ရန် သေချာပါစေ။လိုအပ်ပါက 37 ကို ကြိုတင်အပူပေးပါ။°မိုးရေပျော်စေရန် ဆယ်မိနစ်ခန့် ရေချိုးပြီး အသုံးမပြုမီ ရောမွှေပါ။
-Foregene Protease ဖြေရှင်းချက်တွင် အခန်းအပူချိန်တွင် အချိန်ကြာမြင့်စွာ သိမ်းဆည်းထားသည့်အခါတွင် ထူးခြားသော ဖော်မြူလာတစ်ခုပါရှိသည်။4 ℃ တွင် သိမ်းဆည်းသောအခါ ၎င်း၏ လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် တည်ငြိမ်မှု ပိုကောင်းလာမည်ဖြစ်၍ ၎င်းကို 4 ℃ တွင် သိမ်းဆည်းရန် အကြံပြုထားပြီး ၎င်းကို -20 ℃ တွင် သိမ်းဆည်းရန် မမေ့ပါနှင့်။
-အခြောက်မှုန့် Lysozyme ကို -20°C တွင် သိမ်းဆည်းသည်။ပြင်ဆင်ထားသော Lysozyme ဖြေရှင်းချက်ကို အပိုင်းငယ်များခွဲ၍ -20°C တွင် သိမ်းဆည်းထားသည်။