ForeDirect RT-qPCR Kit
Kit ဖော်ပြချက်-
◮RNA သန့်စင်ခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်များမပါဘဲ swab စုဆောင်းမှုများမှ တိုက်ရိုက်အချိန်နှင့်တစ်ပြေးညီ ချဲ့ထွင်ခြင်းအတွက်။ဤကိရိယာသည် qRT-PCR လည်ပတ်မှုများကို တစ်နာရီအတွင်း အပြီးသတ်သည်။အင်ဇိုင်းရောနှောခြင်းသည် Reverse Transcriptase၊ Hot-Start Taq DNA polymerase၊ RNase inhibitor ၏ အကောင်းဆုံးသော ရောစပ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။Reaction Buffer တွင် ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ထားသော ကြားခံအစိတ်အပိုင်းများဖြစ်သည့် Mg အပါအဝင် လိုအပ်သော အစိတ်အပိုင်းများ ပါဝင်သည်။2+၊ dUTP နှင့် dNTPs
ဖော်ပြချက်
ForeDirect RT-qPCR Kit သည် RNA သန့်စင်မှုလုပ်ငန်းစဉ်များမပါဘဲ swab စုဆောင်းမှုများမှ RNA တိုက်ရိုက်အချိန်နှင့်တစ်ပြေးညီ ချဲ့ထွင်မှုအတွက် ဒီဇိုင်းထုတ်ထားသည်။ဤကိရိယာသည် qRT-PCR လည်ပတ်မှုများကို တစ်နာရီအတွင်း အပြီးသတ်သည်။အင်ဇိုင်းရောနှောခြင်းသည် Reverse Transcriptase၊ Hot-Start Taq DNA polymerase၊ RNase inhibitor ၏ အကောင်းဆုံးသော ရောစပ်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။Reaction Buffer တွင် ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ထားသော ကြားခံအစိတ်အပိုင်းများဖြစ်သည့် Mg အပါအဝင် လိုအပ်သော အစိတ်အပိုင်းများ ပါဝင်သည်။2+၊ dUTP နှင့် dNTPs
သတ်မှတ်ချက်များ
100T
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
| Nucleic acid ကို ထုတ်လွှတ်သော အေးဂျင့် |
| RNA အကာအကွယ် |
| 2× RT-qPCR ကြားခံ |
| အင်ဇိုင်းအရောအနှော(Taq&M-MLV) |
| ညွှန်ကြားချက်များ |
PCR လျှောက်လွှာ
1. PCR တုံ့ပြန်မှုပြွန်များကို ခေတ္တ ဗဟိုပြုပြီး ချဲ့ထွင်သည့် တူရိယာနမူနာကန်တွင် ၎င်းတို့ကို ထားရှိပါ။
2. အပူပရိုတိုကော
| အဆင့် | အပူချိန် | အချိန် | ဟုတ်ရဲ့လား။ | |
| 1 | စာသားပြောင်းပြန် | 50 ℃ | 15 မိနစ် | 1 |
| 2 | အကြို denaturation | 95 ℃ | ၁ မိနစ် | 1 |
| 3 | Denaturation | 95 ℃ | ၁၀ စက္ကန့် | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60 ℃ | 30 စက္ကန့် | |
မှတ်ချက် -လည်ပတ်မှုတစ်ခုစီ၏ တိုးချဲ့မှုအဆင့်ပြီးနောက် ရောင်ရမ်းမှုအချက်ပြမှုကို တွေ့ရှိခဲ့သည်။
3. သတ်မှတ်ပြီးနောက်၊ ဖိုင်ကိုသိမ်းဆည်းပြီး တုံ့ပြန်မှုပရိုဂရမ်ကို လုပ်ဆောင်ပါ။
လည်ပတ်မှုအဆင့်များ
ဓါတ်ဆေးမွမ်းမံပြင်ဆင်ခြင်းမပြုမီ၊ အစုံပါရှိ ဓာတ်ပစ္စည်းများအားလုံးကို အခန်းအပူချိန်တွင် ရောမွှေပြီး ညင်သာစွာ ရောစပ်သင့်သည်။
Reagent ပြင်ဆင်ခြင်း။
1. Nucleic Acid Release Mix ကို ပြင်ဆင်ပါ။
| အစိတ်အပိုင်း | နမူနာ သို့မဟုတ် ထိန်းချုပ်မှုတစ်ခုအတွက် ပမာဏ |
| Nucleic acid ကို ထုတ်လွှတ်သော အေးဂျင့် | 5μL |
| RNA အကာအကွယ် | 0.5 μL |
2. Reaction Mix ကို ပြင်ဆင်ပါ။
| အစိတ်အပိုင်း | နမူနာ သို့မဟုတ် ထိန်းချုပ်မှုတစ်ခုအတွက် ပမာဏ |
| 2× RT-qPCR ကြားခံ | 15 μL |
| အင်ဇိုင်းအရောအနှော(Taq&M-MLV) | 1.5 μL |
| Primers နှင့် Probes | 1μL |
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
- ပစ္စည်းကို 20 တွင်သိမ်းဆည်းရမည်။± 5℃.သက်တမ်းသည် 12 လဖြစ်သည်။
- ထပ်ခါတလဲလဲ အေးခဲနေသော သံသရာ (<5 cycles) ကို ရှောင်ပါ။
