Mouse Tail SuperDirect PCR Kit Direct PCR Lysis Reagent(Mouse Tail)(မျိုးရိုးလိုက်ခြင်းအတွက်)
သတ်မှတ်ချက်များ
ဤကိရိယာသည် PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက် မောက်စ်အမြီးနှင့် ကြွက်နားနမူနာများမှ မျိုးဗီဇ DNA ကို လျင်မြန်စွာထုတ်လွှတ်ရန် ထူးခြားသော lysis ကြားခံစနစ်ကို အသုံးပြုထားသောကြောင့် ၎င်းသည် အကြီးစားမျိုးရိုးဗီဇစစ်ဆေးမှုအတွက် အထူးသင့်လျော်ပါသည်။
lysis ကြားခံမှ genomic DNA ကို ထုတ်လွှတ်သည့် လုပ်ငန်းစဉ် ပြီးမြောက်သည်။10-30 မိနစ်အတွင်းမှာအခန်းအပူချိန် (20-25)°C).အပူပေးစရာမလိုပါ၊ ပရိုတင်းနှင့် RNA ဖယ်ရှားခြင်းကဲ့သို့သော အခြားလုပ်ငန်းစဉ်များ မလိုအပ်ပါ။ထုတ်လွှတ်သော DNA ၏ခြေရာခံပမာဏကို PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက် Template အဖြစ်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။
2×M-PCR လွယ်ကူသည်။TM ရောနှောသည် PCR တုံ့ပြန်မှုတားဆေးများကို ပြင်းထန်စွာခံနိုင်ရည်ရှိပြီး ထိရောက်ပြီး တိကျသောချဲ့ထွင်မှုအတွက် နမူနာပုံစံအဖြစ် စမ်းသပ်ရန် နမူနာ၏ lysate ကို အသုံးပြုနိုင်သည်။ဤဓာတ်ပစ္စည်းများတွင် Foregene D-Taq DNAPolymerase၊ dNTPs၊ MgCl ပါရှိသည်။2တုံ့ပြန်မှုကြားခံ၊ PCR ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်လုပ်ဆောင်ခြင်းနှင့် တည်ငြိမ်မှု။
D-Taq DNA polymerase သည် တိုက်ရိုက် PCR တုံ့ပြန်မှုများအတွက် Foregene မှ အထူးထုတ်လုပ်ထားသော DNA polymerase ဖြစ်သည်။D-Taq DNA polymerase သည် PCR တုံ့ပြန်မှုတားဆေးအမျိုးမျိုးကို ပြင်းထန်စွာခံနိုင်ရည်ရှိပြီး ရှုပ်ထွေးသောတုံ့ပြန်မှုစနစ်အမျိုးမျိုးတွင် DNA ၏ခြေရာခံပမာဏကို ထိရောက်စွာချဲ့ထွင်နိုင်ပြီး Direct PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက် အထူးသင့်လျော်သည့် 2Kb/min သို့ရောက်ရှိနိုင်သည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
50×20µl rxns၊ 200×20µl rxns၊ 500×20µl rxns၊ 2000×20µl rxns
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
အပိုင်း | ကြားခံ NP |
Foregene Protease Plus I | |
6× DNA Loading Buffer | |
ဒုတိယပိုင်း | 2 × M PCR EasyTM ရောနှော |
ညွှန်ကြားချက်များ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
■အချိန်ကုန်ပြီး ဈေးကြီးသော DNA သန့်စင်ရန် မလိုအပ်ပါ။
■ နမူနာဝယ်လိုအားသည် သေးငယ်သည်၊ 2mm အထက်ရှိ မောက်စ်အမြီးများ (သို့မဟုတ် အချင်း 2-5mm ရှိ) မောက်စ်နားရွက်ကို ယူပါ။
■ လည်ပတ်ရလွယ်ကူသည်၊ ပရိုတိန်းဓာတ်ကိုအသက်မသွင်းရန် အပူမပါပဲ lysed နိုင်ပြီး၊ lysed ထုတ်ကုန်သည် PCR တုံ့ပြန်မှုတွင် တိုက်ရိုက်သက်ရောက်နိုင်သည်။
■ Foregene Mouse Tail Genomic DNA Extraction Kit (DE-05211) ကို ပြုပြင်ပြီး ကြွက်အမြီးမှ မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူရန် အသုံးပြုနိုင်သည်။
■ Optimized PCR စနစ်သည် PCR တွင် ပိုမိုတိကျသော တိကျမှုနှင့် PCR တုံ့ပြန်မှုတားဆေးများကို ပိုမိုခံနိုင်ရည်ရှိစေသည်။
Kit ဘောင်များ
အသုံးချနည်း- ကြွက်အမြီး၊ ကြွက်နားရွက်၊ ကြွက်သားနှင့် အခြားတစ်ရှူးများ။
နမူနာ lysis မှ ထုတ်လွှတ်သော DNA- PCR နမူနာပုံစံအဖြစ်သာ အသုံးပြုသည်။
အစုံအလင်ကို အောက်ပါရည်ရွယ်ချက်များအတွက် သုံးနိုင်သည်- transgenosis ကို ဖော်ထုတ်ခြင်း၊ တိရစ္ဆာန် မျိုးရိုးလိုက်ခြင်း စသည်တို့။
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
ဤကိရိယာ၏အပိုင်း I ကို 2-8 ဒီဂရီတွင်သိမ်းဆည်းသင့်သည်။
Buffer FP ကို ခြောက်သွေ့သောအခြေအနေအောက်တွင် 12 လကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။2-8 ℃ တွင် ကြာကြာသိမ်းဆည်းနိုင်သည်။
Reagent Foregene Protease တွင်ထူးခြားသောဖော်မြူလာရှိသည်။၎င်း၏လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် တည်ငြိမ်မှုရှိစေရန် ကျေးဇူးပြု၍ 4 ℃ တွင် 12 လကြာ သိမ်းဆည်းပါ။
Reagent 6×DNA Loading Buffer ကို 4 ℃ သို့မဟုတ် -20 ℃ တွင် အချိန်ကြာမြင့်စွာ သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။
ဤကိရိယာ၏အပိုင်း II ကို -20 ℃တွင်သိမ်းဆည်းသင့်သည်။
Reagent 2×PCR EasyTM Mix ကို မကြာခဏအသုံးပြုပါက၊ ၎င်းကို ရေတိုသိုလှောင်မှုအတွက် 4℃ တွင် သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည် (10 ရက်အတွင်းအသုံးပြုနိုင်သည်)။