RNA ထုတ်ယူခြင်းအကြောင်း

လွန်ခဲ့သော အနှစ်သုံးဆယ်က RNA ထုတ်ယူမှုအတွက်၊ ကျွန်ုပ်တို့တွေးနိုင်သောအရာမှာ ပြီးပြည့်စုံသော RNA ကို မည်သို့ရရှိနိုင်မည်နည်း၊ သို့သော် ထုတ်ယူမှုအမြန်နှုန်းအတွက် လိုအပ်ချက် (Trizol နည်းလမ်း၏ ပထမမျိုးဆက် နည်းပညာဗေဒ) မလိုအပ်ပါ။RNA ထုတ်ယူခြင်းနည်းပညာ၏ ထပ်လောင်းမွမ်းမံမှုနှင့်အတူ၊ ကျွန်ုပ်တို့လုပ်ဆောင်နိုင်သည့်အရာသည် ရလဒ်များရရှိရန် အကန့်အသတ်မရှိပါ။ပထမမျိုးဆက် Trizol-based reagents များကို ထုတ်ယူခြင်းနှင့် ရင်ဆိုင်ရသောအခါတွင် စမ်းသပ်သူများသည် ၎င်း၏ ခက်ခဲကြမ်းတမ်းသော ခွဲစိတ်မှုအဆင့်များကြောင့် ယေဘူယျအားဖြင့် ပြဿနာတက်ကြသည်။ပိုမိုကောင်းမွန်အောင် ပြုပြင်မှုများနှင့် ဆန်းသစ်တီထွင်မှုများ အများအပြား ပြုလုပ်ပြီးနောက်တွင်မူ အချိန်များစွာ ယူရသေးသည်။တစ်ချိန်တည်းမှာပင်၊ ဖီနောနှင့် ကလိုရိုဖောင်ကဲ့သို့သော အော်ဂဲနစ်ဓာတ်ပစ္စည်းများကို ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်တွင် အသုံးပြုရန် လိုအပ်ပြီး သက်ဆိုင်ရာဝန်ထမ်းများ၏ ဘေးကင်းမှုကို အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ ခြိမ်းခြောက်လျက်ရှိသည်။

ထိရောက်၊ အဆင်ပြေပြီး ဘေးကင်းပါတယ်။

ထိရောက်သော၊ အဆင်ပြေပြီး ဘေးကင်းသော RNA ထုတ်ယူသည့် ထုတ်ကုန်ကို ရှာဖွေခြင်းသည် စမ်းသပ်သူများ၏ အဓိက ရည်မှန်းချက် ဖြစ်လာသည်။ထို့ကြောင့် RNA ထုတ်ယူမှုအတွက် Silica Spin Column စုပ်ယူမှုနည်းလမ်း စတင်ပေါ်ပေါက်လာခဲ့သည်။Foregene ၏တတိယမျိုးဆက် RNA ထုတ်ယူခြင်းထုတ်ကုန်များသည်တစ်ချိန်တည်းမှာပင် GDNA နှင့်တစ်ရှူးအပျက်အစီးများနှင့်တစ်ပြိုင်နက်တည်းမြောက်ချေးခြင်း,

လုပ်ဆောင်ချက် လုပ်ငန်းစဉ် နှိုင်းယှဉ်ဇယား

စမ်းသပ်ရလဒ်များ နှိုင်းယှဉ်ဇယား

Foregene စုစုပေါင်း RNA အထီးကျန်ပစ္စည်းကိရိယာသည် RNA ထုတ်ယူမှုအထွက်နှုန်းမြင့်မားသည်၊ သန့်ရှင်းစင်ကြယ်ပြီး miRNA ၏ထုတ်ယူမှုအကျိုးသက်ရောက်မှုသည်အခြားအမှတ်တံဆိပ်ကိရိယာများထက်ပိုမိုကောင်းမွန်သည်

မတူညီသောနည်းလမ်းများဖြင့် ကြွက်အသည်းစုစုပေါင်း RNA 50 မီလီဂရမ်၏ အီလက်ထရိုဖိုရစစ်
ပထမမျိုးဆက် (1: Trizol)
ဒုတိယမျိုးဆက် (၂- ကုမ္ပဏီ A မှ RNA ထုတ်ယူမှုကိရိယာအစုံ)
တတိယမျိုးဆက် (၃- ကုမ္ပဏီ A မှ RNA ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာ ပေါင်း၊ 4- Foregene: RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာများ)

qPCR ဂရပ် (ချဲ့ထွင်မှုမျဉ်းဂရပ်)

RNA ထုတ်ယူစဉ်အတွင်း မျိုးရိုးဗီဇ DNA ကို ထိထိရောက်ရောက် ဖယ်ရှားရမည်၊ မဟုတ်ပါက ၎င်းသည် ရေအောက်ပိုင်းစမ်းသပ်မှုများ (အစောပိုင်း CT တန်ဖိုး၊ မှားယွင်းသော အပြုသဘောများ) ပေါ်တွင် ထိန်းချုပ်မရသော သက်ရောက်မှုများ ရှိလိမ့်မည်။Foregene မျိုးဆက်သစ်ကိရိယာအစုံသည် DNase ထပ်တိုးခြင်းမရှိဘဲ မျိုးရိုးဗီဇ DNA ကို ပြီးပြည့်စုံစွာ ဖယ်ရှားနိုင်ပြီး ပြင်ပမှ RNase ညစ်ညမ်းမှုမှ ဖြစ်ပေါ်လာသော ပျက်စီးယိုယွင်းမှုကို ရှောင်ရှားနေစဉ် အချိန်များစွာ သက်သာစေသည်။
ပထမမျိုးဆက် (အစိမ်းရောင်သည် TRlzol-၊ အနီရောင်သည် TRlzol+ ကိုဖော်ပြသည်)

ဒုတိယမျိုးဆက် (အပြာရောင်သည် ကုမ္ပဏီ A RNA ထုတ်ယူမှုကိရိယာအစုံကို ညွှန်ပြသည် -၊ အနီရောင်သည် ကုမ္ပဏီ A RNA ထုတ်ယူမှုကိရိယာ + ကိုရည်ညွှန်းသည်)

တတိယမျိုးဆက် (အပြာရောင်သည် ကုမ္ပဏီ A RNA ထုတ်ယူမှုကိရိယာ အပေါင်းကို ညွှန်ပြသည်၊ အစိမ်းရောင်သည် Foregene RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာများကို ရည်ညွှန်းသည်)

(မှတ်ချက်- qPCR ဂရပ်တွင် “_” သည် DNase မထည့်ရသေးကြောင်း ညွှန်ပြပြီး DNA ၏ ညစ်ညမ်းမှုကို မဖယ်ရှားရသေးကြောင်း ညွှန်ပြသည်၊ “+” သည် DNase ကို ထည့်သွင်းထားပြီး၊ DNA ၏ ညစ်ညမ်းမှုကို ဖယ်ရှားလိုက်ကြောင်း ဖော်ပြသည်)

11 မိနစ်အတွင်း RNA ထုတ်ယူမှုကို အပြီးသတ်ပါ။

နျူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်းအတွေ့အကြုံကို နှစ်ပေါင်းများစွာ စုဆောင်းမှုမလိုအပ်ဘဲ၊ Foregene ၏စွမ်းဆောင်ရည်မြင့်မားသော RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာအစုံလိုက်စီးရီးထုတ်ကုန်များသည် အမျိုးမျိုးသောအောက်ပိုင်းစမ်းသပ်မှုလိုအပ်ချက်များကိုဖြည့်ဆည်းရန် 11 မိနစ်အတွင်း အထွက်နှုန်းမြင့်မားပြီး သန့်ရှင်းစင်ကြယ်သော RNA ကိုရရှိနိုင်မည်ဖြစ်သည်။

ယခုအချိန်အထိ Foregene စုစုပေါင်း RNA isolaton kits စီးရီးထုတ်ကုန်များကို ဖောက်သည်အများအပြားက အသိအမှတ်ပြုထားပြီး အမှတ်အများဆုံး စာပေများစွာကို ပံ့ပိုးပေးထားသည်။ဖောက်သည်၏ အမှန်တကယ်အသုံးပြုမှုသည် တုံ့ပြန်ချက် electrophoresis ဇယားနှင့် ပမာဏ PCR ချဲ့ထွင်ခြင်းမျဉ်းကွေးကို Foregene ထုတ်ကုန်များအသုံးပြုခြင်းဖြင့် ထုတ်ယူရရှိသော RNA သည် အာရုံစူးစိုက်မှုမြင့်မားရုံသာမက သမာဓိအားကောင်းကြောင်း ပြသပါသည်။စျေးကွက်မှ စမ်းသပ်ထားသော ထုတ်ကုန်နည်းပညာကိုသာ လူတိုင်းနှစ်သက်နိုင်မည်ဖြစ်သည်။

ဆဲလ်စုစုပေါင်း RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာ

မြင့်မားသော RNA အထွက်နှုန်း

အမြန်- 11 မိနစ်အတွင်း RNA အထီးကျန်မှုကို အပြီးသတ်ပါ။

ဘေးကင်းရေး- အော်ဂဲနစ် ဓာတုပစ္စည်း လုံးဝမထည့်ပါ။

အချို့သော ရမှတ်မြင့်မားသော ကိုးကားချက်များ-

1. Yuan Fang, Zezhong Liu, Yang Qiu, et al.ဒီဇိုင်နာ peptides ဖြင့် RNAi ပရိုတင်းများ၏ ဗိုင်းရပ်စ်နှိမ်နင်းခြင်းကို တားမြစ်ခြင်းသည် vivo၊ Immunity၊ 54(10)၊ 2021: 2231-2244.e6 တွင် enteroviral ကူးစက်ခြင်းမှ ကာကွယ်ပေးသည်။(IF:31.745၊Viral RNA Isolation KitCat No.RE-02011)

https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S1074761321003617

2. Ren, Y., Wang, A., Wu, D. et al.လူ့ cytomegalovirus ပရိုတင်း UL37x1 အားဖြင့် မွေးရာပါ ကိုယ်ခံစွမ်းအားနှင့် apoptosis နှစ်ခုကို ဟန့်တားခြင်းသည် ထိရောက်သော ဗိုင်းရပ်စ်မျိုးပွားမှုကို အထောက်အကူပြုသည်။Nat Microbiol 7၊ 1041–1053 (2022)။(IF:30.964၊ဆဲလ်စုစုပေါင်း RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာCat No.RE-03111)

https://doi.org/10.1038/s41564-022-01136-6