အပင်အရွက် Direct PCR kit-UNG (နမူနာကိရိယာများမပါဘဲ) Protocol သည် အပင်ထွက်ပစ္စည်းမှ တိုက်ရိုက် PCR
ဖော်ပြချက်
Plant Leaf Direct PCR အစုံအလင်ကို အခြေခံ၍ dUTP ကို dTTP အစား အသုံးပြုထားပြီး dUTP ပါရှိသော နမူနာပုံစံကို ပျက်စီးစေမည့် UNG အင်ဇိုင်းကို ပေါင်းထည့်ထားသည်။ဤနည်းအားဖြင့်၊ ချဲ့ထွင်ခြင်း၏ တိကျမှုနှင့် တိကျမှုကို သေချာစေပြီး အကြီးစားမျိုးဗီဇစမ်းသပ်မှုအတွင်း ဖြစ်ပွားနိုင်သည့် PCR ထုတ်ကုန်ညစ်ညမ်းမှုပြဿနာကို တားဆီးထားသည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
50×20µl rxns၊ 200×20µl rxns၊ 500×20µl rxns၊ 2000×20µl rxns
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
အပိုင်း | ကြားခံ P1 |
ကြားခံ P2 | |
6×DNA Loading Buffer | |
ဒုတိယပိုင်း | 2× အရွက် PCR အလွယ်TMရောနှော(UNG) |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
■ အချိန်ကုန်ပြီး ဈေးကြီးသော DNA သန့်စင်မှု မရှိပါ။
■ ပစ္စည်းနည်းတယ်။
■ ရိုးရှင်းသော-နမူနာကို ဖြတ်တောက်ခြင်း သို့မဟုတ် ကြိတ်ခြင်းမရှိဘဲ PCR တုံ့ပြန်မှု သို့မဟုတ် lysis တုံ့ပြန်မှုတွင် သက်ရောက်နိုင်သည်။
■ 2 × ရောနှောခြင်း၊ နမူနာတင်ခြင်းအမှားများနှင့် တုံ့ပြန်မှုစနစ်ပြင်ဆင်ချိန်ကို လျှော့ချခြင်း။
■ အမြန်ပုံစံပြင်ဆင်မှုကို 10 မိနစ်အတွင်း ပြီးမြောက်နိုင်ပြီး PCR တုံ့ပြန်မှုကို အနည်းဆုံး မိနစ် 50 တွင် ပြီးမြောက်နိုင်သည်
■ High throughput-lysis reaction သည် 96-well PCR plate တွင် ပြီးမြောက်နိုင်သည်။
Kit ဘောင်များ
အပလီကေးရှင်း- မျိုးရိုးဗီဇပြုပြင်ထားသော ခွဲခြားသတ်မှတ်ခြင်း၊ မျိုးရိုးလိုက်ခြင်း စသည်တို့။
နမူနာ- အပင်အရွက်
ဆေးပမာဏ- အချင်း 2-3mm (တိုက်ရိုက်နည်းလမ်း)၊ အချင်း 5-7mm (lysis method)
ထောက်လှမ်းမှုအပိုင်း- ပစ်မှတ်အပိုင်း ≤1kb
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
လျှပ်စစ်ဓာတ်မှန်ရိုက်ခြင်း။
နှစ်ပတ်ကြာ PCR ရောစပ်မှု စစ်ဆေးမှုရလဒ်များသည် PCR ချဲ့ထွင်ခြင်း ထုတ်ကုန်ညစ်ညမ်းမှုအခြေအနေအောက်တွင် ရလဒ်များ။