QuickEasyᵀᴹ အချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR Kit-Taqman
ဖော်ပြချက်
2× QuickEasyTMQuickEasy မှပေးသော Real PCR Mix-TaqmanTMReal Time PCR Kit-Taqman kit သည် သီးခြား fluorescent probes ကို အသုံးပြု၍ Real Time PCR ချဲ့ထွင်မှုတုံ့ပြန်မှုအတွက် ဒီဇိုင်းထုတ်ထားသော မျိုးဆက်သစ် မာစတာရောနှောစနစ်တစ်ခုဖြစ်သည်။၎င်း၏အဓိက Foregene HS Taq DNA Polymerase သည် Foregene နှင့်တွဲဖက်အသုံးပြုထားသော Antibody ပြုပြင်မွမ်းမံမှုအပေါ်အခြေခံပြီး ပိုမိုကောင်းမွန်သော PCR စနစ်၊ ပိုမိုတိကျမှုနှင့် ချဲ့ထွင်မှုထိရောက်မှုရှိသည်။သာမန် PCR ရောနှောခြင်းနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက ၎င်းသည် ပိုမိုအားကောင်းသော ချဲ့ထွင်နိုင်စွမ်းနှင့် မကိုက်ညီမှုနှုန်း နည်းပါးသည်။သီးခြားမဟုတ်သော ချဲ့ထွင်မှုကို လျှော့ချရန်နှင့် PCR ၏တိကျမှုကို မြှင့်တင်ရန် fluorescence quantitative PCR တုံ့ပြန်မှုတွင် ၎င်းကို အသုံးပြုနိုင်သည်။၎င်းသည် ထုတ်ကုန်၏ တိကျမှုနှင့် တုံ့ပြန်မှု အာရုံခံနိုင်စွမ်းကို အလွန်တိုးတက်စေနိုင်သည်။တစ်ချိန်တည်းမှာပင် ROX အား အတွင်းပိုင်းရည်ညွှန်းဆိုးဆေးအဖြစ် ထောက်ပံ့ပေးခဲ့သည်။
QuickEasyTMReal Time PCR Kit-Taqman kit တွင် ပုံစံပလိတ်ပမာဏအတွက် ကျယ်ပြန့်စွာအသုံးချနိုင်သော နယ်ပယ်တစ်ခု ရှိပြီး မတူညီသော ပမာဏဒေသများရှိ စံမျဉ်းကွေးကို ရယူနိုင်ပြီး တိကျစွာ တိုင်းတာနိုင်သော မျိုးဗီဇများကို ကောင်းမွန်စွာ ထပ်တလဲလဲနိုင်မှုနှင့် ယုံကြည်စိတ်ချမှု မြင့်မားစွာဖြင့် ရှာဖွေနိုင်မည်ဖြစ်သည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၂၀၀၊ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၅၀၀၊ပြင်ဆင်မှု ၁၀၀၀၊ပြင်ဆင်မှု 2000
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
QuickEasyTMအချိန်နှင့်တပြေးညီ PCR Kit-Taqman(၂၀μlစနစ်) | ||||
Kit အကြောင်းအရာများ | QP-01121 | QP-01122 | QP-01123 | QP-01124 |
ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၂၀၀ | ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု 500 | ပြင်ဆင်မှု ၁၀၀၀ | ပြင်ဆင်မှု 2000 | |
2×အမြန်လွယ်ပါတယ်။TM တကယ့် PCR ရောမွှေပါ။-Taqman | 1 mL×2 | 1.7 မီလီမီတာ×3 | 1.7 မီလီမီတာ×6 | 1.7 မီလီမီတာ×12 |
20×ROX ရည်ညွှန်း ဆိုးဆေး | ၂၀၀μL | 0.5 mL | 1 mL | 1 mL×2 |
DNase-Free ddH2O | 1.7 မီလီမီတာ | 1.7 မီလီမီတာ×2 | 10 mL | 20 mL |
IFU | 1အပိုင်းအစ | 1အပိုင်းအစ | 1အပိုင်းအစ | 1အပိုင်းအစ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
■ ထူးခြားသော PCR ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ခြင်းစနစ်သည် 2×QuickEasy ကို ပြုလုပ်ပေးသည်။TMReal PCR Mix-Taqman သည် ပို၍ လိုက်ဖက်သည်။
■ Hot-start Foregene HS Taq Polymerase တွင် ပိုမိုမြင့်မားသော ချဲ့ထွင်မှု ထိရောက်မှု၊ ပိုမိုချဲ့ထွင်မှု အာရုံခံနိုင်စွမ်းနှင့် ပိုမိုမြင့်မားသော ချဲ့ထွင်မှု တိကျမှုတို့ ပါဝင်သည်။
■ ၂× QuickEasyTM Real PCR Mix -Taqman သည် genotyping နှင့် copy number ကွဲလွဲမှု ဆုံးဖြတ်ခြင်းအတွက် အသုံးပြုနိုင်ပြီး တိကျသောရလဒ်များရရှိရန် sequence-specific probe detection ၏ အာရုံခံနိုင်စွမ်းနှင့် တိကျမှုကို မြှင့်တင်ရန်အတွက် Foregene မှ အထူးပြုလုပ်ထားသော ထူးခြားသောစနစ်ကို အသုံးပြုပါသည်။
■ ဤထုတ်ကုန်သည် ရေတွင်းများကြားတွင် အချက်ပြနောက်ခံနှင့် အချက်ပြအမှားများကို ဖယ်ရှားရန်အတွက် အသုံးပြုနိုင်သည့် ROX အတွင်းပိုင်းရည်ညွှန်းဆိုးဆေးပါရှိပြီး သုံးစွဲသူများအတွက် အရေအတွက်အမျိုးမျိုးသော PCR တူရိယာအမျိုးအစားများတွင် အသုံးပြုရန် အဆင်ပြေစေပါသည်။
Kit လျှောက်လွှာ
■ ပုံစံပလိတ် ပမာဏခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုအတွက် မီးသွေးရောင်စုံ ပမာဏ PCR၊
■ Cသမားရိုးကျ PCR ချဲ့ထွင်ခြင်း၊
■ Allele ထောက်လှမ်းခြင်းအတွက် အသုံးပြုနိုင်သည်။.
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
ကိရိယာကို အမှောင်ထဲတွင် -20°C တွင် သိမ်းဆည်းထားသင့်သည်။မကြာခဏအသုံးပြုပါက 4°C တွင် အချိန်တိုအတွင်း သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည် (10 ရက်အတွင်းအသုံးပြုနိုင်သည်)။
Real Time PCR primer ဒီဇိုင်းအခြေခံမူ
ရှေ့သို့ Primer နှင့် Reverse Primer
Real Time PCR အတွက်၊ primer ဒီဇိုင်းသည် အလွန်အရေးကြီးပါသည်။Primers များသည် PCR amplification ၏ တိကျမှုနှင့် ထိရောက်မှုတို့နှင့် ဆက်စပ်နေပြီး အောက်ပါအခြေခံမူများကို ကိုးကား၍ ဒီဇိုင်းထုတ်နိုင်သည်။
Primer အရှည်- 18-30bp။
GC ပါဝင်မှု- 40-60%။
Tm တန်ဖိုး- Primer 5 ကဲ့သို့သော Primer ဒီဇိုင်းဆော့ဖ်ဝဲသည် primer ၏ Tm တန်ဖိုးကို ပေးနိုင်သည်။အထက်ပိုင်းနှင့် အောက်ပိုင်း primers များ၏ Tm တန်ဖိုးများသည် တတ်နိုင်သမျှ နီးစပ်သင့်သည်။Tm တွက်ချက်မှုဖော်မြူလာကိုလည်း သုံးနိုင်သည်- Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T)။PCR ကိုလုပ်ဆောင်သောအခါ၊ primer Tm တန်ဖိုး 5°C အောက်ရှိ အပူချိန်ကို annealing temperature အဖြစ် ယေဘူယျအားဖြင့် ရွေးချယ်သည် (သက်ဆိုင်ရာ အပူချိန်တိုးလာခြင်းသည် PCR တုံ့ပြန်မှု၏ တိကျမှုကို တိုးလာစေသည်)။
Primers နှင့် PCR ထုတ်ကုန်များ
ဒီဇိုင်း primer PCR amplification ထုတ်ကုန်အရှည်သည် 100-150bp ပိုကောင်းသည်။
ပုံစံပလိတ်၏ အလယ်တန်းဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ ဧရိယာရှိ ဒီဇိုင်း primer များကို တတ်နိုင်သမျှ ရှောင်ရှားသင့်သည်။
အထက်ပိုင်းနှင့် မြစ်အောက်ပိုင်းရှိ ပလာစတာများ၏ 3′ စွန်းများကြားတွင် ဖြည့်စွက်အခြေ 2 ခု သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပိုသော အခြေများဖွဲ့စည်းခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။
Primer 3′ terminal base သည် နောက်ထပ် 3 ဆက်တိုက် G သို့မဟုတ် C ဖြင့် မတည်ရှိနိုင်ပါ။
Primers များတွင် ၎င်းတို့ကိုယ်တိုင် ဖြည့်စွက်ဖွဲ့စည်းပုံများ မပါဝင်နိုင်ပါ၊ သို့မဟုတ်ပါက ဆံပင်ညှပ်ဖွဲ့စည်းပုံသည် PCR ချဲ့ထွင်မှုကို ထိခိုက်စေပါသည်။
ATCG ကို primer sequence တွင်တတ်နိုင်သမျှအညီအမျှဖြန့်ဝေသင့်ပြီး 3′ terminal base ကို T အဖြစ်ရှောင်ရှားသင့်သည်။
နောက်ဆက်တွဲ 1:Cell Direct RT-qPCR Kit အစိတ်အပိုင်း ဖြည့်စွက်စာထုပ်
1.Cell Lysis ဖြေရှင်းချက်
| |||
Kit အစိတ်အပိုင်းများ (24-well lysis system/ well)၊ | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 T | 500 T | ||
အပိုင်းငါ | ကြားခံ CL | 20 ml | 100 ml |
Foregene Protease Plus II | 400 μl | 1 ml × 2 | |
ကြားခံ ST | 1 ml × 2 | 10 ml | |
အပိုင်းII | DNA Eraser | 400 μl | 1 ml × 2 |
2.RT ရောသမမွှေပါ။
| |
Kit အစိတ်အပိုင်းများ (20 μl တုံ့ပြန်မှုစနစ်) | DRT-01011-B1 |
200 T | |
5× တိုက်ရိုက် RT ရောနှောခြင်း။ | 800 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml × 2 |
| ||
Kit အစိတ်အပိုင်းများ (20 μl တုံ့ပြန်မှုစနစ်) | DRT-01011-C1 | DRT-01011-C2 |
200 T | 1000 T | |
2× တိုက်ရိုက် qPCR ရောနှော-SYBR | 1 ml × 2 | 1.7 ml × 6 |
50× ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး | 40 μl | 200 μl |
RNase-Free ddH2O | 1.7 ml | 10 ml |