ဗိုင်းရပ်စ် DNA နှင့် RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာ ဗိုင်းရပ်စ် DNA နှင့် RNA ထုတ်ယူခြင်း သန့်စင်ရေးပြင်ဆင်မှုအစုံအလင်
သတ်မှတ်ချက်များ
ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၅၀၊ ပြင်ဆင်မှု ၂၀၀
Viral RNA Nucleic acid Purification Extraction Isolation Kit သည် Foregene မှ တီထွင်ထားသော လှည့်ပတ်ကော်လံနှင့် ဖော်မြူလာကို အသုံးပြုထားပြီး ပလာစမာ၊ သွေးရည်ကြည်၊ ဆဲလ်ကင်းစင်သော ခန္ဓာကိုယ်အရည်များနှင့် ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှု supernatant ကဲ့သို့သော နမူနာများမှ သန့်စင်ပြီး အရည်အသွေးမြင့် ဗိုင်းရပ်စ် RNA ကို ထိရောက်စွာ ထုတ်ယူနိုင်သည်။နမူနာများမှ RNA ပမာဏအနည်းငယ်ကို အလွယ်တကူဖမ်းယူနိုင်သည့် Linear Acrylamide ကို အထူးထည့်သွင်းထားသည်။RNA-Only Column သည် RNA ကို ထိထိရောက်ရောက် စည်းနိုင်သည်။ကိရိယာအစုံသည် တစ်ချိန်တည်းတွင် နမူနာအများအပြားကို လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။
ပစ္စည်းကိရိယာတစ်ခုလုံးတွင် RNase မပါဝင်သောကြောင့် သန့်စင်ထားသော RNA သည် ပျက်ယွင်းသွားမည်မဟုတ်ပါ။Buffer viRW1 နှင့် Buffer viRW2 သည် ရရှိထားသော ဗိုင်းရပ်စ် နူကလိစ်အက်ဆစ်သည် ပရိုတင်း၊ နျူကလိတ် သို့မဟုတ် အခြားသော အညစ်အကြေးများ ကင်းစင်ကြောင်း သေချာစေကာ ရေအောက် မော်လီကျူး ဇီဝဗေဒ စမ်းသပ်မှုများအတွက် တိုက်ရိုက်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
Linear Acrylamide |
ကြားခံ DRL |
Buffer RW1၊ Buffer RW2 |
RNase-Free ddH2O |
DNA/RNA ကော်လံ |
ညွှန်ကြားချက်များ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
■ အခန်းအပူချိန် (15-25 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်) တွင် ရေခဲရေချိုးခြင်းနှင့် အပူချိန်နိမ့်ဆင်းခြင်းမရှိဘဲ လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုလုံးတွင် လုပ်ဆောင်ခြင်း။
■ အစုံအလင် RNase-Free၊ RNA ပျက်စီးခြင်းအတွက် စိတ်ပူစရာမလိုပါ။
■ မြင့်မားသော နျူကလိစ်အက်ဆစ်အထွက်နှုန်း- DNA/RNA သီးသန့်ကော်လံနှင့် ထူးခြားသောဖော်မြူလာသည် DNA နှင့် RNA ကို ထိရောက်စွာသန့်စင်ပေးနိုင်သည်။
■ ကြီးမားသောနမူနာလုပ်ဆောင်နိုင်စွမ်း- 200μlနမူနာများအထိ တစ်ကြိမ်စီ လုပ်ဆောင်နိုင်ပါသည်။
■ မြန်ဆန်သောအမြန်နှုန်း- လည်ပတ်ရလွယ်ကူပြီး မိနစ် 20 အတွင်း ပြီးစီးနိုင်သည်။
■ ဘေးကင်းရေး- အော်ဂဲနစ် ဓာတ်ပစ္စည်းများ မလိုအပ်ပါ။
■ အရည်အသွေးမြင့်- သန့်စင်ထားသော RNA အပိုင်းအစများသည် မြင့်မားသောသန့်ရှင်းမှု၊ ပရိုတင်းနှင့် အခြားအညစ်အကြေးများ ကင်းစင်ပြီး အမျိုးမျိုးသော ရေစုန်စမ်းသပ်မှုဆိုင်ရာ အသုံးချမှုများကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။
Kit လျှောက်လွှာ
၎င်းသည် ပလာစမာ၊ သွေးရည်ကြည်၊ ဆဲလ်ကင်းစင်သော ခန္ဓာကိုယ်အရည်နှင့် ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှု supernatant ကဲ့သို့သော နမူနာများတွင် ဗိုင်းရပ်စ်နျူကလစ်အက်ဆစ်ကို ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သန့်စင်ရန်အတွက် သင့်လျော်သည်။
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
ပုံကြမ်း
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
■ ဤကိရိယာကို အခန်းအပူချိန် (15-25 ℃);အချိန်ပိုကြာအောင် သိမ်းဆည်းလိုပါက 2-8°C တွင် သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။
■ Linear Acrylamide ဖြေရှင်းချက်ကို အခန်းအပူချိန်တွင် ၇ ရက်ကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။အစုံကိုလက်ခံရရှိပြီးနောက်၊ ကျေးဇူးပြု၍ထုတ်ထုတ်ပြီး -20°C တွင်သိမ်းဆည်းပါ။
■ Linear Acrylamide ကို Buffer DRL တွင် ပေါင်းထည့်ပြီးနောက်၊ ၎င်းကို 2-8°C တွင် 48 နာရီအထိ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။အဆင်သင့်လုပ်ထားသော ဖြေရှင်းချက်ကို အသုံးပြုပါ။
ပြဿနာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းလမ်းညွှန်
အောက်ပါတို့သည် သင့်စမ်းသပ်ချက်များအတွက် အထောက်အကူဖြစ်မည်ဟု မျှော်လင့်ထားသော ဗိုင်းရပ်စ် DNA/RNA ထုတ်ယူရာတွင် ကြုံတွေ့နိုင်သည့် ပြဿနာများကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှုတစ်ခုဖြစ်သည်။ထို့အပြင်၊ စစ်ဆင်ရေးညွှန်ကြားချက်များနှင့် ပြဿနာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းမှလွဲ၍ အခြားသော စမ်းသပ်မှု သို့မဟုတ် နည်းပညာဆိုင်ရာ ပြဿနာများအတွက်၊ သင့်အား ကူညီရန် ကျွန်ုပ်တို့တွင် သီးသန့်နည်းပညာပံ့ပိုးမှုရှိပါသည်။လိုအပ်ချက်များရှိပါက 028-83360257 သို့ E-mail ဖြင့် ဆက်သွယ်နိုင်ပါသည်။
Tech@foregene.com.
nucleic acid ထုတ်ယူခြင်း သို့မဟုတ် nucleic acid အထွက်နှုန်းနည်းပါးခြင်း။
ပြန်လည်ရယူခြင်း၏ ထိရောက်မှုအပေါ် သက်ရောက်မှုရှိသော အကြောင်းရင်းများစွာရှိပါသည်၊ ဥပမာ- nucleic acid ပါဝင်မှု၊ လည်ပတ်မှုနည်းလမ်း၊ elution volume စသည်တို့ကဲ့သို့သော အကြောင်းအချက်များစွာရှိပါသည်။
အဖြစ်များသော အကြောင်းရင်းများကို လေ့လာခြင်း-
1. ရေခဲရေချိုးခြင်း သို့မဟုတ် အပူချိန်နိမ့်သော (4°C) လုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း အာရုံစူးစိုက်မှု ပြုလုပ်ခဲ့သည်။
အကြံပြုချက်- လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုလုံးတွင် အခန်းအပူချိန် (15-25°C) တွင် လုပ်ဆောင်ပါ၊ ရေခဲရေချိုးခြင်းနှင့် အပူချိန်နိမ့်သော အာရုံစူးစိုက်မှုမလုပ်ပါနှင့်။
2. နမူနာအား မှားယွင်းစွာ သိမ်းဆည်းထားခြင်း သို့မဟုတ် နမူနာအား အကြာကြီးသိမ်းဆည်းထားခြင်းဖြစ်သည်။
အကြံပြုချက်- နမူနာများကို -80°C တွင် သိမ်းဆည်းပြီး ထပ်ခါတလဲလဲ အေးခဲခြင်းနှင့် အရည်ပျော်ခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။nucleic acid ထုတ်ယူရန်အတွက် လတ်လတ်ဆတ်ဆတ်စုဆောင်းထားသောနမူနာများကို အသုံးပြုကြည့်ပါ။
3. နမူနာ lysis မလုံလောက်ပါ။
အကြံပြုချက်- နမူနာနှင့် lysis အလုပ်လုပ်သည့်အဖြေကို အခန်းအပူချိန် (15-25°C) တွင် 10 မိနစ်ကြာ နှံ့စပ်အောင် ရောစပ်ထားကြောင်း သေချာပါစေ။
4. eluent ၏ မှားယွင်းသော ထပ်တိုးမှု။
အကြံပြုချက်- RNase-Free ddH2O ကို သန့်စင်သောကော်လံအမြှေးပါး၏အလယ်တွင် drop-wise ပေါင်းထည့်ထားကြောင်း သေချာစေကာ၊ ၎င်းကို သန့်စင်သောကော်လံလက်စွပ်ပေါ်တွင် မချပါနှင့်။
5. အကြွင်းမဲ့ အီသနော၏ မှန်ကန်သော ပမာဏကို Buffer RW2 တွင် ထည့်မထားပါ။
အကြံပြုချက်- ညွှန်ကြားချက်များကို လိုက်နာပါ၊ မှန်ကန်သော အီသနော၏ ပမာဏကို Buffer RW2 တွင် ထည့်ကာ အစုံအလင်ကို အသုံးမပြုမီ ကောင်းစွာ ရောမွှေပါ။
6. မသင့်လျော်သောနမူနာအသံအတိုးအကျယ်။
အကြံပြုချက်- Buffer DRL ၏ 500µl တိုင်းအတွက် နမူနာ 200µl ကို စီမံဆောင်ရွက်သည် ။နမူနာများကို အလွန်အကျွံလုပ်ဆောင်ခြင်းသည် နူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူမှုအထွက်နှုန်းကို လျော့နည်းစေသည်။
7. မသင့်လျော်သော elution အသံအတိုးအကျယ် သို့မဟုတ် မပြည့်စုံသော elution။
အကြံပြုချက်- သန့်စင်ကော်လံ၏ ထင်ရှားသော ပမာဏမှာ 30-50μl ဖြစ်သည်။elution effect သည် ကျေနပ်ဖွယ်မရှိပါက၊ 5-10min ကဲ့သို့သော preheated RNase-Free ddH2O ကိုထည့်ပြီးနောက် အခန်းအပူချိန်တွင် အချိန်ကို တိုးမြှင့်ရန် အကြံပြုထားသည်။
8. Buffer RW2 ဖြင့် ဆေးကြောပြီးနောက် အီသနောသည် ကော်လံပေါ်တွင် ကျန်နေပါသည်။
အကြံပြုချက်- Buffer RW2 ဖြင့် 2 မိနစ်ကြာ centrifugation ပြီးနောက် အီသနော ကျန်နေခဲ့ပါက၊ ကျန်နေသော အီသနောကို အပြည့်အ၀ ဖယ်ထုတ်ရန်အတွက် ကော်လံကို အခန်းအပူချိန်တွင် 5 မိနစ်ကြာ ထားနိုင်သည်။
သန့်စင်ထားသော nucleic acid သည် ပျက်စီးသွားပါသည်။
သန့်စင်ထားသော nucleic acid ၏ အရည်အသွေးသည် နမူနာကို ထိန်းသိမ်းခြင်း၊ RNase ညစ်ညမ်းခြင်း၊ လည်ပတ်ခြင်းနှင့် အခြားအချက်များနှင့် သက်ဆိုင်ပါသည်။အဖြစ်များသော အကြောင်းရင်းများကို လေ့လာခြင်း-
1. စုဆောင်းထားသောနမူနာများကို အချိန်မီသိမ်းဆည်းထားခြင်းမရှိပါ။
အကြံပြုချက်- နမူနာကို စုဆောင်းပြီးနောက် အချိန်မီအသုံးမပြုပါက၊ ကျေးဇူးပြု၍ အပူချိန်နိမ့်သောအပူချိန်တွင် -80°C တွင် ချက်ချင်းသိမ်းဆည်းပါ။RNA ထုတ်ယူရန်အတွက်၊ အသစ်စုဆောင်းထားသောနမူနာများကို အသုံးပြုကြည့်ပါ။
2. နမူနာများကို စုဆောင်းပြီး အေးခဲပြီး ထပ်ခါထပ်ခါ နွေးထွေးအောင်ထားပါ။
အကြံပြုချက်- နမူနာများကို စုဆောင်းသိမ်းဆည်းစဉ်အတွင်း အေးခဲခြင်းနှင့် ရောနှောခြင်း (တစ်ကြိမ်ထက်ပို၍) ရှောင်ကြဉ်ပါ၊ သို့မဟုတ်ပါက nucleic acid အထွက်နှုန်း လျော့ကျသွားမည်ဖြစ်သည်။
3. RNase ကို ခွဲစိတ်ခန်းတွင် မိတ်ဆက်ပေးသည် သို့မဟုတ် တစ်ခါသုံးလက်အိတ်များ၊ မျက်နှာဖုံးများ စသည်တို့ကို မဝတ်ဆင်ပါ။
အကြံပြုချက်- RNA ထုတ်ယူစမ်းသပ်မှုများကို သီးခြား RNA ခွဲစိတ်ခန်းတွင် အကောင်းဆုံးလုပ်ဆောင်ပြီး စမ်းသပ်မှုမပြုလုပ်မီ ဓာတ်ခွဲခန်းဇယားကို သန့်စင်သင့်သည်။
RNase ၏နိဒါန်းတွင် အကြီးမားဆုံးအတိုင်းအတာအထိ ဖြစ်လာသော RNA ပျက်စီးမှုကို ရှောင်ရှားရန် တခါသုံးလက်အိတ်များနှင့် နှာခေါင်းစည်းများ ဝတ်ဆင်ပါ။
4. အသုံးပြုနေစဉ်အတွင်း ဓါတ်ဆေးသည် RNase နှင့် ညစ်ညမ်းနေပါသည်။
အကြံပြုချက်- ဆက်စပ်စမ်းသပ်မှုများအတွက် Viral DNA/RNA Isolation Kit အသစ်ဖြင့် အစားထိုးပါ။
5. RNA ခြယ်လှယ်မှုအတွက် အသုံးပြုသည့် အာရုံခံပြွန်များနှင့် ပိုက်လိုင်းများ သည် RNase နှင့် ညစ်ညမ်းနေပါသည်။
အကြံပြုချက်- RNA ထုတ်ယူမှုအတွက် အသုံးပြုသည့် centrifuge tubes၊ pipette tips, pipettes စသည်တို့သည် RNase-Free ဖြစ်ကြောင်း သေချာပါစေ။
သန့်စင်ထားသော နူကလိယအက်ဆစ်သည် ရေအောက်ပိုင်းစမ်းသပ်မှုများကို အကျိုးသက်ရောက်သည်။
သန့်စင်ရေးကော်လံမှ DNA နှင့် RNA တို့ကို သန့်စင်စေသည်၊ ဆားအိုင်းယွန်းနှင့် ပရိုတင်းဓာတ်ပါဝင်မှု မြင့်မားပါက၊ PCR ချဲ့ထွင်ခြင်း၊ ပြောင်းပြန်ကူးယူခြင်း စသည်တို့ကဲ့သို့သော ရေအောက်စမ်းသပ်မှုများအပေါ် သက်ရောက်မှုရှိမည်ဖြစ်သည်။
1. ဖယ်ထုတ်ထားသော DNA နှင့် RNA တွင် ကျန်ရှိသော ဆားအိုင်းယွန်းများရှိသည်။
အကြံပြုချက်- အကြွင်းမဲ့ အီသနော၏ မှန်ကန်သော ပမာဏကို Buffer RW2 တွင် ထည့်ထားကြောင်း သေချာစေပြီး လည်ပတ်မှု ညွှန်ကြားချက်တွင် သတ်မှတ်ထားသည့် centrifugation speed ဖြင့် သန့်စင်သောကော်လံကို နှစ်ကြိမ် ဆေးကြောပါ။ဆားအိုင်းယွန်းညစ်ညမ်းမှုကို လျှော့ချရန် ဗဟိုချုပ်ကိုင်မှုပြုလုပ်ပါ။
2. ဖယ်ထုတ်ထားသော DNA နှင့် RNA များတွင် အီသနော အကြွင်းအကျန်များရှိသည်။
အကြံပြုချက်- Buffer RW2 ဖြင့် ဆေးကြောခြင်းအား အတည်ပြုပြီးနောက်၊ လည်ပတ်မှုညွှန်ကြားချက်တွင် centrifugation speed ဖြင့် ဗလာပြွန် centrifugation ကို လုပ်ဆောင်ပါ။အီသနောအကြွင်းအကျန်ရှိနေသေးပါက၊ သင်သည် အီသနောအကြွင်းအကျန်များကို အကြီးကျယ်ဆုံးအထိ ဖယ်ရှားနိုင်စေရန် ပိုက်အလွတ်ကို ဗဟိုပြု၍ အခန်းအပူချိန်တွင် 5 မိနစ်ခန့်ထားနိုင်သည်။
ညွှန်ကြားချက်လက်စွဲများ-
ဗိုင်းရပ်စ် DNA နှင့် RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာ လမ်းညွှန်လက်စွဲ