ရေးသားသူ- Wang Xiaoyan၊ Zhao Eryu

ယူနစ်- Jiaozhou ဆေးရုံ၊ Dongfang ဆေးရုံ၊ Tongji တက္ကသိုလ်နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည်။

လက်ရှိတွင်၊ အသက်ရှူလမ်းကြောင်းဆိုင်ရာ ရောဂါပိုးဆိုင်ရာ နူကလိစ်အက်ဆစ်ကို ရှာဖွေခြင်းအတွက် အဓိကနမူနာအမျိုးအစားမှာ လည်ချောင်းသုတ်ဆေးဖြစ်သည်။အသုံးများသောနမူနာထိန်းသိမ်းခြင်းဖြေရှင်းနည်းများ အများအပြားရှိပါသည်၊ ၎င်းတို့အားလုံးကို သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးနှင့် သိုလှောင်ရန်အတွက် အအေးခန်း သို့မဟုတ် အေးခဲထားရန် လိုအပ်ပါသည်။စုဆောင်းခြင်းနှင့် သယ်ယူပို့ဆောင်ရေး လုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း အပူချိန်နိမ့်သည့် လုပ်ငန်းစဉ်တစ်ခုလုံးကို ထိန်းချုပ်ရန် ခက်ခဲပြီး နမူနာစမ်းသပ်ခြင်းမပြုမီ အရည်အသွေးထိန်းချုပ်ရန် သေချာရန်ခက်ခဲသည်။^[1-2].

RNase (RNase) သည် RNA ကို hydrolyzes လုပ်ပေးသော endonuclease ဖြစ်ပြီး အဓိကအားဖြင့် nucleotides များကြား phosphodiester နှောင်ကြိုးများကို ဖြတ်တောက်သည်။RNase မော်လီကျူးသည် အလွန်တည်ငြိမ်သည်၊ ဖွဲ့စည်းတည်ဆောက်ပုံတွင် disulfide နှောင်ကြိုးများပါရှိပြီး ၎င်း၏လုပ်ဆောင်မှုမှာ divalent cations များရှိနေရန် မလိုအပ်သောကြောင့် RNase သည် အလွယ်တကူ denatured မဖြစ်သည့်အပြင် အပူချိန်မြင့်သော သို့မဟုတ် denaturant များအသုံးပြုသည့်တိုင် ပြန်လည်ရှင်သန်ရန် လွယ်ကူသည်။RNase များကို endogenous နှင့် exogenous ဟူ၍ ပိုင်းခြားထားသည်။ဆဲလ်များ ပေါက်ပြဲသွားသောအခါတွင် endogenous RNases များကို ထုတ်လွှတ်နိုင်သည်။ထို့ကြောင့်၊ endogenous RNases ၏အခန်းကဏ္ဍကိုဖယ်ရှားခြင်းသည် RNA ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်တွင်အလွန်အရေးကြီးသောခြေလှမ်းဖြစ်သည်။Exogenous RNases များကို ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် ဖြန့်ဝေပါသည်။RNases သည် လေ၊ လူ့အရေပြား၊ ဆံပင်နှင့် တံတွေးတို့တွင် တည်ရှိပြီး RNA ၏ ပျက်စီးလွယ်ခြင်းအတွက် အရေးကြီးသော အကြောင်းရင်းများဖြစ်သည်။^[3].

အချက်အလက်မေးမြန်းမှု

CANS-CL02-A009 "မော်လီကျူးရောဂါရှာဖွေခြင်းနယ်ပယ်တွင် ဆေးဘက်ဆိုင်ရာဓာတ်ခွဲခန်းအရည်အသွေးနှင့် အရည်အချင်းအသိအမှတ်ပြု လမ်းညွှန်ချက်များ လျှောက်ထားခြင်း" နည်းပညာဆိုင်ရာလိုအပ်ချက်များတွင် လျှောက်လွှာနှင့်အညီ သင့်လျော်သောရေအရည်အသွေးစံနှုန်းများကို ရေးဆွဲသင့်ကြောင်း အဆိုပြုပါသည်။တစ်ခါသုံး လေလုံသော ကွန်တိန်နာများ

RNase/အမျိုးအစားခွဲခြားခြင်း။

(၁) RNase A၊

Ribonuclease A (RNase A) သည် ဘော်ဗာပန်ကရိယမှ ဆင်းသက်လာသော endoribonuclease ဖြစ်ပြီး RNA ရှိ pyrimidine အကြွင်းအကျန်များ၏ 3′ အဆုံးကို အတိအကျ တိုက်ခိုက်နိုင်ပြီး၊ ကပ်လျက်နယူကလီယိုမှ ဖွဲ့စည်းထားသော cytosine သို့မဟုတ် uracil ကို ဖြတ်တောက်နိုင်သည်။Phosphodiester Bond၊ တုံ့ပြန်မှု၏နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်မှာ 3′ pyrimidine nucleotide နှင့် အဆုံးတွင် 3′ pyrimidine nucleotide ပါရှိသော oligonucleotide ဖြစ်သည်။

(၂) RNase T1

Ribonuclease T1 (RNase T1) သည် Aspergillus orjzae မှဆင်းသက်လာသည်၊ ၎င်းသည် guanine ၏ 3′-terminal phosphate တွင် အထူးလုပ်ဆောင်နေပြီး ခွဲထွက်သည့်နေရာသည် guanine ၏ 3′ phosphate နှင့် ကပ်လျက် nucleotides ၏ 5′ hydroxyl ကြားဖြစ်သည်။တုံ့ပြန်မှု၏နောက်ဆုံးထုတ်ကုန်မှာ 3′guanylic acid နှင့် oligonucleotide အပိုင်းအစများအဆုံးတွင် 3′guanylic acid ဖြစ်သည်။

(၃) RNase H၊

Ribonuclease H (RNase H) ကို ခြေသလုံးကြွက်သား တစ်သျှူးမှ စတင်တွေ့ရှိခဲ့ပြီး ၎င်း၏ ကုဒ်ဗီဇကို Escherichia coli အဖြစ် ပုံတူပွားခဲ့သည်။၎င်းသည် အထူးအားဖြင့် DNA ကို ချေဖျက်နိုင်သည်- RNA ပေါင်းစပ်ထားသော နှစ်ခုတွဲရှိ RNA ကြိုးများသည် 3′-OH နှင့် 5′-monophosphate အဆုံးများနှင့်အတူ oligonucleotides နှင့် mononucleotides တို့ကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်၊ ၎င်းသည် single- သို့မဟုတ် double-stranded DNA သို့မဟုတ် RNA ကို မပြိုပျက်စေပါ။

RNase

Function နှင့် အသုံးပြုခြင်း။

Ribonuclease သည် ribonucleic acid (RNA) ၏ ပျက်စီးယိုယွင်းမှုကို လှုံ့ဆော်ပေးနိုင်ပြီး အတုဖြင့် ပေါင်းစပ်နိုင်သည်။ဒဏ်ရာနှင့် အဆစ်အမြစ်နာကျင်ခြင်းအတွက် ဆေးဖက်ဝင်ဆီလိမ်းဆေးကို လိမ်းဆေးအသုံးပြုသည်။အစီရင်ခံစာများအရ ribonuclease သည် အိမ်ရှင်ဆဲလ်များ၏ ဇီဝြဖစ်ပျက်မှုကို ပြောင်းလဲနိုင်သည်၊ ဗိုင်းရပ်စ်ပေါင်းစပ်မှုကို တားဆီးနိုင်သည်၊ တုပ်ကွေးဗိုင်းရပ်စ်ပိုးများ ဗီထရိုအတွင်း ပျံ့နှံ့မှုကို ဟန့်တားနိုင်ပြီး ကြက်သန္ဓေသားများတွင် ကာကွယ်ဆေးနှင့် ရေယုန်ဗိုင်းရပ်စ်များ ဖြစ်ပေါ်မှုကို ဟန့်တားနိုင်သည်။ribonuclease ၏နေ့စဉ်အကြောထိုးဆေး 180 mg ကိုလက်တွေ့အသုံးပြုခြင်းဖြင့်ကူးစက်ရောဂါဦးနှောက်ရောင်ရောဂါကိုကုသရာတွင်အကျိုးရှိသော၊ ribonuclease သည် ribonucleic acid (RNA) ၏ပြိုကွဲမှုကိုလှုံ့ဆော်ပေးနိုင်ပြီး ယခုအခါအတုဖြင့်ပေါင်းစပ်နိုင်သည်။ဒဏ်ရာနှင့် အဆစ်အမြစ်နာကျင်ခြင်းအတွက် ဆေးဖက်ဝင်ဆီလိမ်းဆေးကို လိမ်းဆေးအသုံးပြုသည်။အစီရင်ခံစာများအရ ribonuclease သည် အိမ်ရှင်ဆဲလ်များ၏ ဇီဝြဖစ်ပျက်မှုကို ပြောင်းလဲနိုင်သည်၊ ဗိုင်းရပ်စ်ပေါင်းစပ်မှုကို တားဆီးနိုင်သည်၊ တုပ်ကွေးဗိုင်းရပ်စ်ပိုးများ ဗီထရိုအတွင်း ပျံ့နှံ့မှုကို ဟန့်တားနိုင်ပြီး ကြက်သန္ဓေသားများတွင် ကာကွယ်ဆေးနှင့် ရေယုန်ဗိုင်းရပ်စ်များ ဖြစ်ပေါ်မှုကို ဟန့်တားနိုင်သည်။ribonuclease 180 mg ကိုနေ့စဉ်အကြောထိုးဆေးကိုလက်တွေ့အသုံးပြုခြင်းသည်ကူးစက်ရောဂါဦးနှောက်ရောင်ခြင်းကိုကုသရန်အတွက်အကျိုးရှိသည်။

RNase

Inhibitor အဓိပ္ပါယ်

RNase inhibitor ယူနစ်၏အဓိပ္ပာယ်ဖွင့်ဆိုချက်- 5ng RNase A ၏လုပ်ဆောင်မှု 50% ကို ဟန့်တားရန် လိုအပ်သော အင်ဇိုင်းပမာဏသည် တစ်ယူနစ်ဖြစ်သည်။

RNase Inhibitors အလုပ်လုပ်ပုံ

Guanidine isothiocyanate:

Guanidine isothiocyanate သည် မော်လီကျူးဖော်မြူလာ C2H6N4S ပါရှိသော အော်ဂဲနစ်ဒြပ်ပေါင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ဇီဝဗေဒဆေးပညာ၊ ဓာတုဗေဒပစ္စည်းများ၊ စသည်တို့တွင် အဓိကအသုံးပြုသည်။ Guanidine isothiocyanate သည် ပရိုတင်း lysing အေးဂျင့်ဖြစ်ပြီး ၎င်းကို မော်လီကျူးရောဂါရှာဖွေရေးပစ္စည်းများတွင် lysis solution ၏ အဓိကအစိတ်အပိုင်းအဖြစ် အသုံးပြုလေ့ရှိသည်။၎င်းသည် တစ်ရှူးများကို lyse လုပ်နိုင်သည်၊ ဆဲလ်ဖွဲ့စည်းပုံကို ဖျက်ဆီးနိုင်ပြီး nucleoprotein မှ nucleic acid ကို ခွဲထုတ်နိုင်ပြီး RNase တွင် ပြင်းထန်သော denaturation ရှိသည်။၎င်းသည် လက်ရှိအချိန်တွင် အထိရောက်ဆုံး RNase inhibitor ဖြစ်သည်။

TRIzol သည် ဆဲလ်များ သို့မဟုတ် တစ်ရှူးများမှ RNA စုစုပေါင်း RNA ကို တိုက်ရိုက်ထုတ်ယူနိုင်သော ဆန်းသစ်သော စုစုပေါင်း RNA ထုတ်ယူသည့် ဓာတ်တစ်မျိုးဖြစ်သည်။၎င်းတွင် phenol နှင့် guanidine isothiocyanate ကဲ့သို့သော အရာများ ပါ၀င်ပြီး ဆဲလ်များကို လျင်မြန်စွာ နှောင့်ယှက်နိုင်ပြီး ဆဲလ်များမှ ထုတ်လွှတ်သော nuclease များကို ဟန့်တားနိုင်သည်။

(သို့သော်လည်း၊ guanidine isothiocyanate သည် ဓာတ်ခွဲခန်းသုတေသီများ၏ ကျန်းမာရေးအတွက် အန္တရာယ်ရှိသည်။)

RNasin-

ကြွက်အသည်း သို့မဟုတ် လူ့ဘလက်စတိုဒမ်မှ ထုတ်ယူထားသော အက်ဆစ် glycoprotein။Rnasin သည် RNase ၏ ယှဉ်ပြိုင်နိုင်စွမ်းမရှိသော တားဆေးတစ်ခုဖြစ်ပြီး ၎င်းတို့ကို အသက်မဝင်စေရန် RNase အမျိုးမျိုးနှင့် ချိတ်ဆက်နိုင်သည်။

(အသေးစိတ်အချက်အလက်များကို https://www.foreivd.com/foreasy-rnase-inhibitor-product/)

Hအပူချိန်

မြင့်မားသော အပူချိန်သည် ပရိုတင်း denaturation ၏ ဘုံနည်းလမ်းတစ်ခုလည်းဖြစ်သည်။

Diethylpyrocarbonate (DEPC)-

DEPC သည် RNase တက်ကြွသောအုပ်စု၏ အမိုင်နိုအက်ဆစ် imidazole လက်စွပ်နှင့် ပေါင်းစပ်ခြင်းဖြင့် RNase လုပ်ဆောင်မှုကို ဟန့်တားနိုင်သည့် အားကောင်းသော်လည်း မပြည့်စုံသော RNase inhibitor ဖြစ်သည်။

Vanadyl ribonucleoside ရှုပ်ထွေးမှု၊

vanadium oxide ions နှင့် nucleosides များဖြင့် ဖွဲ့စည်းထားသော ရှုပ်ထွေးသော အရာဖြစ်ပြီး RNase ၏ လုပ်ဆောင်မှုကို လုံးဝနီးပါး ဟန့်တားနိုင်သည့် အကူးအပြောင်းပုံစံ RNase နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည်။

အခြား

SDS၊ ယူရီးယား၊ diatomaceous earth စသည်တို့သည်လည်း RNase အပေါ် အချို့သော ဟန့်တားသည့် သက်ရောက်မှုရှိသည်။

ကျွမ်းကျင်သူ သုံးသပ်ချက်များ

Li Yujie သည် နည်းပညာရှင်ချုပ်ဖြစ်သည်။

ဓာတ်ခွဲခန်းညွှန်ကြားရေးမှူး၊ Jiaozhou ဆေးရုံ၊ Dongfang ဆေးရုံ၊ Tongji တက္ကသိုလ်နှင့် ချိတ်ဆက်ထားသည်။

Exogenous RNase ၏ ဇီဝရုပ်ဖြစ်ပျက်မှုကို တားဆီးရန်အတွက် RNA ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း နှာခေါင်းစည်းများ၊ လက်အိတ်များနှင့် ဦးထုပ်များကို မကြာခဏ လဲလှယ်ဝတ်ဆင်သင့်သည်။ဖန်ထည်အားလုံးကို 200°C တွင် အခြောက်ခံသောမီးဖိုတွင် 2 နာရီထက်ပို၍ဖုတ်ရပါမည်။ပလပ်စတစ်ကဲ့သို့သော မုန့်ဖုတ်ရာတွင် အသုံးပြုသည့် ပစ္စည်းများအား DEPC ရေဖြင့် ကုသပြီး ပေါင်းခံရေဖြင့် ဆေးကြောရန် လိုအပ်ပါသည်။RNA ၏ ထုတ်ယူခြင်း၊ ထိန်းသိမ်းခြင်းနှင့် ဖော်ထုတ်ခြင်းအတွက် အသုံးပြုသည့် ဓာတ်ပစ္စည်းများ သို့မဟုတ် ကိရိယာများသည် RNA အတွက် ရည်စူးထားသင့်ပြီး သီးခြား RNA လည်ပတ်မှုဧရိယာကို ထူထောင်သင့်သည်။

ကိုးကား-

[1] Smith-Vaughan HC၊ Binks MJ၊ Beissbarth J၊ et al။ဌာနေသြစတြေးလျကလေးများ[J]တွင် စူးရှသောအသက်ရှူလမ်းကြောင်းဆိုင်ရာအောက်ပိုင်းကူးစက်မှုမစတင်မီ ဘက်တီးရီးယားနှင့် ဗိုင်းရပ်စ်ပိုးများသည် nasopharynx ရှိ ဗိုင်းရပ်စ်များဖြစ်သည်။Eur J Clin Microbiol Infect Dis,2018,37 (9): 1785-1794။

[2] တရုတ်ကာကွယ်ဆေးပညာအသင်း၏ ဆေးရုံကူးစက်ရောဂါထိန်းချုပ်ရေးဌာနခွဲ။လက်တွေ့အဏုဇီဝနမူနာများ စုဆောင်းခြင်းနှင့် စစ်ဆေးခြင်းအတွက် လမ်းညွှန်ချက်များ [J]Chinese Journal of Hospital Infection၊ 2018(20):3192-3200။

[3] “လက်တွေ့စမ်းသပ်မှု တစ်သောင်း ဘာကြောင့် မော်လီကျူလာဇီဝဗေဒ စမ်းသပ်မှုပမာဏ”