Nucleic acid ထုတ်ယူခြင်းသည် မော်လီကျူးဇီဝဗေဒ စမ်းသပ်မှုများအတွက် နိဒါန်းကျွမ်းကျင်မှုတစ်ခုဖြစ်သည်။၎င်းသည် ဤကျွမ်းကျင်မှုကို ကျွမ်းကျင်စွာ အသုံးပြုနိုင်သည်ဖြစ်စေ နောက်ပိုင်းတွင် စမ်းသပ်လေ့လာသူများအတွက်လည်း စမ်းသပ်မှုဆိုင်ရာ ကျွမ်းကျင်သူများထံ အဆင့်မြှင့်တင်ရန် မဖြစ်မနေ လိုအပ်ချက်များ ဖြစ်လာပါသည်။
မတူညီသော သုတေသန ပစ္စည်းများအရ၊ စမ်းသပ်သူများကို အဓိကအားဖြင့် အောက်ပါသုံးမျိုး ခွဲခြားထားသည်။
တိရစ္ဆာန်အဓိက၊ အပင်အဓိက၊ အဏုဇီဝဗေဒအဓိက
စမ်းသပ်သူ အမျိုးအစားတစ်ခုစီသည် သီးသန့်နမူနာများအတွက် သီးသန့်ကျွမ်းကျင်မှုအစုံကို ပြုစုပျိုးထောင်ရန် မိတ္တူများကို ဆက်လက်ကူးယူပါမည်။
ယနေ့တွင် တည်းဖြတ်သူသည် ထောင်တွင်းမှတစ်ဆင့် မရရှိနိုင်သော ကိရိယာများနှင့် ကိရိယာအချို့ကို စမ်းသပ်သူများထံ ယူဆောင်လာစေလိုပါသည်။၎င်းတို့နှင့်အတူ၊ သင်သည် လမ်းကြောင်းအားလုံးတွင် လျင်မြန်စွာ အဆင့်မြှင့်နိုင်သည်။စမ်းသပ်နတ်ဘုရားဖြစ်ဖို့ အိပ်မက်မဟုတ်ဘူး။
ဤပြဿနာသည် အပင်ပရော်ဖက်ရှင်နယ်စမ်းသပ်သူများအတွက်ဖြစ်သည် (အခြားအသက်မွေးဝမ်းကြောင်းဆိုင်ရာစမ်းသပ်သူများသည် ၎င်းထံမှသင်ယူနိုင်သည်~)။
စမ်းသပ်သူ မျိုးဆက်တိုင်းသည် ဂန္ထဝင် အပင် နျူကလိစ် အက်ဆစ် ထုတ်ယူနည်းများကို ၎င်းတို့၏ ဘိုးဘေးများထံမှ မျိုးဆက်တစ်ခုမှ တစ်ခုသို့ လွှဲပြောင်းပေးသည်ကို ကြားဖူးကြမည်ဟု ယုံကြည်ပါသည်။စက်ရုံထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းတွင် နာမည်ကြီးကြီးသုံးခုရှိသည်။
အကောင်ကြီးတွေက ထူးချွန်ပေမယ့် ရှောင်လွှဲလို့မရတဲ့ ချို့ယွင်းချက်တွေ ရှိနေတုန်းပါပဲ။
TRIzol နည်းလမ်း
မကြာခဏ ထုတ်ယူလေ့ရှိသည်။
RNA
●အဆိပ်သင့်ပြီး ခက်ခဲသည်။
● ဂျီနိုမ်ညစ်ညမ်းမှု ပါဝင်ခြင်း။
CTAB နည်းလမ်း
မကြာခဏ ထုတ်ယူလေ့ရှိသည်။
ဂျီနိုအာDNA
● အချိန်ကုန်တယ်။
● ဆားထက် ဆေးကြောခြင်းဖြင့် CTAB ကို ဖယ်ရှားရန် ပိုခက်ခဲသည်၊ အနည်းငယ်မျှသော အကြွင်းအကျန်များသည် အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်အပေါ် ကြီးမားသော သက်ရောက်မှုရှိလိမ့်မည်
SDS နည်းလမ်း
မကြာခဏ ထုတ်ယူလေ့ရှိသည်။
ပလာမစ်
● polysaccharide ပါဝင်မှု မြင့်မားသော အပင်များအတွက် မသင့်လျော်ပါ။
● ပရိုတင်းဓာတ် ညစ်ညမ်းခြင်း။
အရှိန်နှစ်ဆ ထပ်မွမ်းမံမှုများ ပြုလုပ်ထားသော ခေတ်မီလူ့အဖွဲ့အစည်းတွင်၊ သမားရိုးကျ လည်ပတ်မှုနည်းလမ်းများသည် စမ်းသပ်သူများ၏ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်တော့မည် မဟုတ်တော့ဘဲ စက်ကိရိယာများ အဆင့်မြှင့်တင်မှုများ နီးကပ်လာပါပြီ။
Foregene Nucleic Acid Extraction Kit ကို စမ်းသပ်သူ ဒါဇင်ပေါင်းများစွာက N အကြိမ် စမ်းသပ်ခဲ့သည်။၎င်းသည် လည်ပတ်ရန် ရိုးရှင်းသည်၊ မည်သည့် အဆိပ်ဖြစ်စေသော ဓာတ်ပစ္စည်းများကို အသုံးမပြုဘဲ မည်သည့် အင်ဇိုင်းများ မထည့်ပါ။ရရှိသော နူကလိစ်အက်ဆစ်သည် မြင့်မားသော သန့်စင်မှုဖြစ်ပြီး၊ အလွန်ကောင်းမွန်သော စမ်းသပ်သူများ၏ နေ့စဉ်ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းအတွက် မရှိမဖြစ်လိုအပ်ပါသည်။
Foregene RNA Isolation အစုံ
ဤတွင်၊ အပင်အမျိုးအစားအလိုက် သင့်လျော်သော ထုတ်ယူသည့်နည်းလမ်းကို ရွေးချယ်ရန် (အပင်အမျိုးအစားကို ဆောင်းပါးအဆုံးတွင် ဆုံးဖြတ်ရန်)၊ အချို့သောအပင် polysaccharides နှင့် polyphenols များပါဝင်မှုမြင့်မားသောကြောင့် အချို့သောအပင် polysaccharides နှင့် polyphenols များပါဝင်မှုမြင့်မားပြီး သမားရိုးကျနည်းလမ်းများသည် သေစေသောကြောင့် ဤတွင်၊ ဤတွင်၊ စမ်းသပ်သူများအား လျှို့ဝှက်စစ်ဆင်ရေးနည်းပညာကို ဖော်ပြပါမည်။ထိန်းချုပ်ဖို့ မလုံလောက်ဘူး။
အင်း ဒီလိုပါပဲ...
TRIzol နည်းလမ်းသည် ငှက်ပျောရွက်၊ ginkgo အရွက်နှင့် ဝါဂွမ်းရွက်ကဲ့သို့သော မြင့်မားသော ပိုလီဆက်ကာခရိုက်များနှင့် ပိုလီဖီနောများပါရှိသော နမူနာများအောက်တွင် တိုက်ရိုက်ဒူးထောက်ထားသည်။
ဤရည်ရွယ်ချက်အတွက် Foregene သည် စမ်းသပ်သူများအတွက် ထိရောက်သောကိရိယာနှစ်ခုကို တီထွင်ခဲ့သည်။polysaccharide နှင့် polyphenol ပါဝင်မှုနည်းသော polysaccharide နှင့် polyphenol ပါဝင်မှုနည်းသော အပင် RNA ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာသည် ရန်သူများကို ပစ်မှတ်ထားသည့်ပုံစံဖြင့် သတ်နိုင်သည်၊ ထို့ကြောင့် စမ်းသပ်သူများသည် မတူညီသောအပင်များကို မကြောက်တော့ပါ။ပစ္စည်းကို တိုက်ရိုက်ပြောင်းရုံပါပဲ။
ထုတ်ယူသည့်နည်းလမ်းကို အဆင့်မြှင့်ရန်လိုအပ်သည့်အပြင် နမူနာကြိုတင်လုပ်ဆောင်ခြင်းလုပ်ငန်းများကိုလည်း အဆင့်မြှင့်တင်ရန် လိုအပ်ပါသည်။
အပင်နမူနာများ၏ အထူးဖွဲ့စည်းပုံကြောင့် အချို့အပင်များ၏ အမြစ်များနှင့် ခိုင်မာသော ပင်စည်များသည် အညီအမျှ ကြိတ်ချေရန် ပိုမိုခက်ခဲပါသည်။
ကြိတ်ခွဲခြင်းလုပ်ငန်းတွင် လူ 80% ခန့်သည် ကြိတ်ခွဲရန်အတွက် နိုက်ထရိုဂျင်အရည်ကို အသုံးပြုကြပြီး 20% အောက်သည် လျှပ်စစ်ကြိတ်ခြင်းနှင့် ပုတီးစေ့များကို ကြိတ်ခြင်းအား အသုံးပြုကြသည်။
နိုက်ထရိုဂျင်အရည် ကြိတ်ခွဲခြင်းသည် စျေးသက်သက်သာသာနှင့် အသုံးပြုရလွယ်ကူသော်လည်း၊ အကြိမ်တိုင်းနှင့် ကြိုးစားအားထုတ်မှုတိုင်းကို ကြိတ်ရန်လိုအပ်သည့် နမူနာများစွာရှိသော စမ်းသပ်သူများအတွက် အိပ်မက်ဆိုးတစ်ခုဖြစ်သည်။အင်္ဂတေကို မသန့်စင်ပါက နမူနာများကြားတွင် ညစ်ညမ်းမှုဖြစ်စေသည်။
လျှပ်စစ်ကြိတ်ခွဲခြင်း၏ အကျိုးသက်ရောက်မှုသည် လူတစ်ဦးနှင့်တစ်ဦး ကွဲပြားပြီး စမ်းသပ်သူများ၏ လည်ပတ်မှုအလေ့အထများသည် နျူကလိစ်အက်ဆစ်၏ ခိုင်မာမှုအပေါ် ပိုမိုသက်ရောက်မှုရှိမည်ဖြစ်ပြီး လိုအပ်ပါက အပူချိန်နိမ့်သည့် လုပ်ဆောင်ချက် လိုအပ်ပါသည်။
ထို့ကြောင့် ပုတီးစေ့ ကြိတ်ခြင်းအား လက်ရှိ ရိုးရှင်းပြီး ထိရောက်သော ကြိတ်စက်အဖြစ် မှတ်ယူနိုင်ပါသည်။
ယေဘူယျ တုန်လှုပ်ခြင်းမုဒ်များတွင် ဒေါင်လိုက် တုန်ခါခြင်း၊ အလျားလိုက် အပြန်အလှန် လှည့်ပတ်ခြင်း နှင့် သုံးဖက်မြင် (အလျားလိုက် တုန်ခါမှု) တို့ ပါဝင်သည်။သို့သော်၊ Foregene ၏တစ်ရှူးကြိတ်စက်သည် ရှိပြီးသားမော်ဒယ်ကိုဖြတ်ကာ ကြိတ်ချေမှုပိုမိုတူညီစေရန်အတွက် 4D တုန်ခါမှုနည်းလမ်းအသစ်ကို လက်ခံပါသည်။
အမျိုးမျိုးသောနမူနာလိုအပ်ချက်များနှင့်ပြည့်မီ၊ လည်ပတ်ရန်လွယ်ကူသည်။
ထူးခြားသော 4D ကြိတ်ခွဲခြင်းနည်းပညာ၊ ကြိတ်ချေမှုစွမ်းဆောင်ရည် 20% တိုးလာသည်
နမူနာကို အပြည့်အ၀ ဖုံးအုပ်ထားပြီး ရောဂါပိုးမွှားမွှားကူးစက်မှု မရှိပါ။
အသံတိတ်၊ ≤56 ဒက်ဆီဘယ်
စမ်းသပ်မှုရလဒ်များကို လှိုင်းတစ်ခုနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါ။
စမ်းသပ်နမူနာ- 50mg ဂျုံရွက် (ပိုလီဆက်ကာခရိုက်နှင့် ပိုလီဖီနောပါဝင်မှုနည်း)
nucleic acid အမျိုးအစား- RNA ထုတ်ယူသည်။
အစက်အပြောက်ပမာဏ: 5μl
အသုံးပြုသော ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာမှာ Foregene Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05011)၊
ဒေတာနှင့် electrophoresis ဂရပ်ကို နှိုင်းယှဉ်ကြည့်လျှင် စက်ဖြင့် ကြိတ်ခွဲပြီးနောက် ထုတ်ယူလိုက်သော RNA ၏ အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် သန့်စင်မှုသည် နိုက်ထရိုဂျင်အရည်ကြိတ်ခြင်းထက် ပိုမိုမြင့်မားသည်ကို တွေ့မြင်နိုင်သည်။တစ်ချိန်တည်းမှာပင်၊ စက်ဖြင့် ကြိတ်ခွဲခြင်းသည် နမူနာကို ပိုမို၍ ချိုးဖျက်နိုင်သောကြောင့် RNA ငယ်ကို ပိုမိုကောင်းမွန်စွာ ထုတ်ယူနိုင်ပြီး RNA ၏ ခိုင်မာမှုကို ထိန်းသိမ်းနိုင်သည်။
စမ်းသပ်နမူနာ- ginkgo အရွက် 50 မီလီဂရမ် ( polysaccharide နှင့် polyphenol ပါဝင်မှုမြင့်မား)
nucleic acid အမျိုးအစား- RNA ထုတ်ယူသည်။
အစက်အပြောက်ပမာဏ: 5μl
Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Total RNA Extraction Kit (RE-05021) ကိုအသုံးပြုခြင်း
polysaccharides နှင့် polyphenols မြင့်မားစွာပါဝင်သည့် ဤနမူနာအုပ်စုကို ကြည့်ပါ။အကျိုးသက်ရောက်မှုက ပိုလို့တောင် ထင်ရှားပါတယ်။တူညီသောသန့်ရှင်းစင်ကြယ်မှုဖြင့် စက်ကြိတ်ခြင်း RNA ၏အာရုံစူးစိုက်မှုသည် နိုက်ထရိုဂျင်အရည်ကြိတ်ခြင်းထက် 5 ဆနီးပါးရှိပြီး RNA သေးသေးသည် မှုန်ဝါးဝါးမြင်နေရဆဲဖြစ်သည်~
အထက်ဖော်ပြပါ စက်ပစ္စည်းတစ်ခုမှ မလုံလောက်ဟု သင်ခံစားရပါက၊ တည်းဖြတ်သူသည် အဆုံးစွန်သော စက်ကိရိယာကို အသုံးပြုရမည်ဖြစ်ပါသည်။
Plant Direct PCR စီးရီး
ဤစက်ပစ္စည်း၏ထူးခြားသောအင်္ဂါရပ်မှာ အပင်အရွက်များ သို့မဟုတ် အစေ့များကို မြေနှင့်ကွဲရန်မလိုအပ်ဘဲ၊ lysis အတွက် EP tube ထဲသို့ တိုက်ရိုက်ပစ်ချခြင်းဖြစ်ပြီး ရရှိလာသော lysis အရောအနှောကို PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက် ပုံစံပလိတ်အဖြစ်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ခြေတစ်လှမ်းပိုမြန်သလောက် ရိုးရှင်းပါတယ်။တစ်ချိန်တည်းမှာပင်၊ Foregene Plants ၏ တိုက်ရိုက် PCR စီးရီးများကို UNG ညစ်ညမ်းမှုဆန့်ကျင်ရေးစနစ် တပ်ဆင်ထားသောကြောင့် စမ်းသပ်သူများသည် ဓာတ်ခွဲခန်းအတွင်းရှိ လေထုညစ်ညမ်းမှုကို စိတ်ပူစရာမလိုတော့ဘဲ စမ်းသပ်မှုကို အလွယ်တကူ ခံယူနိုင်မည်ဖြစ်သည်။
တရားစီရင်ခြင်းဆိုင်ရာ အကြံပြုချက်များ-
polysaccharide polyphenol အပင်ဟုတ်မဟုတ် ဘယ်လိုဆုံးဖြတ်မလဲ။
20mg တစ်ရှူးဘလောက်ကိုယူ၍ သန့်ရှင်းသော 1.5ml centrifuge tube ထဲသို့ထည့်ကာ 200ul 200mM NaOH solution ကိုထည့်ကာ 95℃ တွင် 10မိနစ်ခန့်ထားကာ lysis ပြီးနောက် အရောင်ပြောင်းလဲခြင်းကို သတိပြုပါ။
1. Lysate ၏အရောင်သည် အစိမ်းရောင် သို့မဟုတ် အဝါဖျော့ဖျော့ဖြစ်ပါက၊ ၎င်းသည် တစ်ရှူးပိုလီဖီနောပါဝင်မှုနည်းသည်ဟု ဆိုလိုပြီး Foregene Plant စီးရီးကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။
2. lysate သည် နီညိုရောင် သို့မဟုတ် နီညိုရောင်ဖြစ်နေပါက၊ တစ်ရှူး polyphenol ပါဝင်မှု မြင့်မားသည်ဟု ဆိုလိုပြီး Foregene Polysaccharide Polyphenol Plant Plus Series ကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်။
ပို့စ်အချိန်- သြဂုတ်-၂၀-၂၀၂၁