Hot-start Taq အင်ဇိုင်းကို တွင်တွင်ကျယ်ကျယ် အသုံးပြုသည်။သာမန် DNA polymerase နှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက hot-start Taq အင်ဇိုင်းသည် အချို့သော သီးခြားမဟုတ်သော ချဲ့ထွင်မှုနှင့် primer dimers များဖွဲ့စည်းခြင်းကို ထိထိရောက်ရောက် ရှောင်ရှားနိုင်ပြီး ပစ်မှတ်မျိုးဗီဇချဲ့ထွင်မှု၏ အောင်မြင်မှုနှုန်းကို ထိရောက်စွာ တိုးတက်စေနိုင်သည်။အထူးသဖြင့် မျိုးရိုးဗီဇစစ်ဆေးခြင်းနယ်ပယ်တွင် hot-start Taq အင်ဇိုင်းကို စက်မှုလုပ်ငန်းတွင် မဖြစ်မနေ စံပြုသတ်မှတ်ထားပြီး သာမန် DNA polymerase ကို အသုံးမပြုသင့်ပါ။အထက်ဖော်ပြပါများမှ တွေ့မြင်နိုင်သကဲ့သို့ hot-start Taq အင်ဇိုင်းများကို တွင်ကျယ်စွာအသုံးပြုကြသည်။လက်ရှိတွင် ပြည်တွင်းဈေးကွက်တွင် hot-start Taq အင်ဇိုင်းအမှတ်တံဆိပ်များစွာရှိသော်လည်း အရည်အသွေးမြင့်သော hot-start Taq အင်ဇိုင်းများ အများအပြားမရှိပါ။Taq အင်ဇိုင်း ထုတ်ကုန်များ အများအပြားနှင့် ရင်ဆိုင်နေရပြီး ကျွန်ုပ်တို့ မည်သို့ ရွေးချယ်သင့်သနည်း။
1. ချဲ့ထွင်နိုင်စွမ်းမြင့်မားသော hot-start Taq အင်ဇိုင်းကိုရွေးချယ်ပါ။
PCR ချဲ့ထွင်မှုစွမ်းဆောင်ရည်သည် Taq အင်ဇိုင်း၏စွမ်းဆောင်ရည်နှင့် နီးကပ်စွာဆက်စပ်နေသည်။ကောင်းသော Taq အင်ဇိုင်းတုံ့ပြန်မှုစနစ်အား ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ပြီးနောက်၊ ချဲ့ထွင်မှုစွမ်းဆောင်ရည်သည် 95% အထက်တွင်ရှိပြီး ကနဦးပုံစံပလိတ်ပမာဏ၏ ချဲ့ထွင်မှုအကွာအဝေးသည် ကျယ်ပြန့်သည်။ပစ်မှတ် ဗီဇပါဝင်မှု နည်းသောအခါတွင် ကျေနပ်ဖွယ်ကောင်းသော ချဲ့ထွင်မှုကို ရရှိနိုင်ပြီး ပုံစံခွက်ပမာဏ များနေသောအခါတွင် အဆိပ်ခတ်ရန် မလွယ်ကူကြောင်း၊ နှင့် ကိန်းဂဏန်းချဲ့ထွင်မှုကာလ ရှည်လျားပါသည်။စွမ်းဆောင်ရည်ညံ့ဖျင်းသော Taq အင်ဇိုင်းအတွက်၊ တုံ့ပြန်မှုစနစ်အား အကြိမ်များစွာ ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ထားသော်လည်း၊ ချဲ့ထွင်မှုစွမ်းဆောင်ရည်သည် 90% ထက်နည်းနေသေးသော်လည်း ချဲ့ထွင်မှုမျဉ်းကွေး၏ "S" ပုံသဏ္ဍာန်သည် ထင်ရှားခြင်းမရှိပါ၊ လျှောစောက်သည် သေးငယ်ကာ၊ မျဉ်းကွေးသည် ပြားနေသည်။ပုံစံပလိတ်ပမာဏနည်းသောအခါ၊ ၎င်းကိုချဲ့ထွင်၍မရပါ၊ နှင့်ပုံစံပလိတ်ပမာဏများနေသောအခါ၊ ချဲ့ထွင်မှုအကျိုးသက်ရောက်မှုသည် စံပြမဟုတ်ပေ။ထို့ကြောင့်၊ မြင့်မားသောချဲ့ထွင်မှုထိရောက်မှုရှိသော DNA polymerase များကိုရွေးချယ်ခြင်းသည် PCR နှင့် qPCR ၏အောင်မြင်မှုအတွက်အရေးကြီးပါသည်။
2. ပြင်းထန်သောအင်ဇိုင်းပါဝါရှိသော hot-start Taq အင်ဇိုင်းကိုရွေးချယ်ပါ။
Taq အင်ဇိုင်း၏အင်ဇိုင်းစွမ်းအားသည် ချဲ့ထွင်မှုထိရောက်မှုနှင့် ဆက်စပ်နေသည်။ယေဘူယျအားဖြင့်၊ hot-start Taq အင်ဇိုင်း၏ အင်ဇိုင်းစွမ်းအား ပိုအားကောင်းလေ၊ PCR ချဲ့ထွင်မှု၏ ထပ်ကိန်းကြီးထွားမှုကာလ ပိုကြာလေ၊ ပုံမှန် 'S-shaped' မျဉ်းကွေး၊ fluorescence အချက်ပြတန်ဖိုး ပိုမြင့်လေ၊ multiplex PCR ထောက်လှမ်းခြင်းအတွက် ပိုသင့်လျော်လေဖြစ်သည်။အင်ဇိုင်းပါဝါအားနည်းသော အမှတ်တံဆိပ် DNA ပေါ်လီမာရတ်များသည် ယေဘူယျအားဖြင့် 2-plex တုံ့ပြန်မှုကိုသာ ပံ့ပိုးပေးနိုင်သည်။3-plex တုံ့ပြန်မှုများပြုလုပ်သောအခါ၊ အသံချဲ့စက်မျဉ်းကွေးနိမ့်သည်၊ fluorescence အချက်ပြတန်ဖိုးနိမ့်သည်၊ ပုံမှန်အသံချဲ့စက်မျဉ်းမရှိသောကြောင့် ရလဒ်များကိုဆုံးဖြတ်ရန်ခက်ခဲသည်။
3. အာရုံခံနိုင်စွမ်းမြင့်မားသော hot-start Taq အင်ဇိုင်းကိုရွေးချယ်ပါ။
ယေဘူယျအားဖြင့်ပြောရလျှင် DNA polymerase သည် မြင့်မားသော ချဲ့ထွင်မှု ထိရောက်မှုနှင့် အာရုံခံနိုင်စွမ်း မြင့်မားသော်လည်း ရှေ့နောက်မညီမှုများလည်း ရှိပါသည်။ချဲ့ထွင်ရမည့်နမူနာ၏ ပစ်မှတ်မျိုးဗီဇ များပြားမှုသည် နည်းပါးပါက၊ Taq အင်ဇိုင်း၏ ချဲ့ထွင်နိုင်စွမ်းကို စမ်းသပ်ရန် အကြံပြုထားသည်။အသုံးအများဆုံး ထောက်လှမ်းခြင်းနည်းလမ်းမှာ ပစ်မှတ် gene plasmid အပိုင်းအစ၏ 10-ဆ သို့မဟုတ် 5-fold gradient မှေးမှိန်ခြင်းအား လုပ်ဆောင်ရန်၊ အောက်ပိုင်းရှိ PCR detection ကို လုပ်ဆောင်ရန်နှင့် ပိုမိုမြင့်မားသော အာရုံခံနိုင်စွမ်းရှိသော hot-start Taq အင်ဇိုင်းကို ရွေးချယ်ရန်ဖြစ်သည်။
သုတေသီများသည် ၎င်းတို့၏ စမ်းသပ်မှုလိုအပ်ချက်များနှင့် ရန်ပုံငွေအခြေအနေများအလိုက် ရွေးချယ်ရန် လိုအပ်ကြောင်း အထက်ပါအချက်များမှ တွေ့မြင်နိုင်သည်။hot-start Taq အင်ဇိုင်း၏ ချဲ့ထွင်မှု ထိရောက်မှုနှင့် အာရုံခံနိုင်စွမ်းကို ရှာဖွေရန် gradient dilution amplification စမ်းသပ်မှုကို ပြုလုပ်ခြင်းသည် အကောင်းဆုံးဖြစ်သည်။
Foregene ၏ဥပမာ's Taq DNA Polymerase:
Foreasy HS Taq DNA Polymerase
ဖော်ပြချက်
Foreasy HS Taq DNA Polymerase သည် မျိုးဗီဇပြန်လည်ပေါင်းစပ်နည်းပညာဖြင့် Escherichia coli အင်ဂျင်နီယာဘက်တီးရီးယားတွင် ဖော်ပြထားသော DNA ပေါ်လီမာဆေးဖြစ်သည်။အင်ဇိုင်းကို ထူးခြားသောတုံ့ပြန်မှုကြားခံတစ်ခုဖြင့် ပေါင်းစပ်ထားသောကြောင့် ထုတ်ကုန်ကို ခံနိုင်ရည်ရှိပြီး သဟဇာတဖြစ်စေပြီး ထောက်လှမ်းတုံ့ပြန်မှုများအတွက် နမူနာပုံစံ lysate (Foregene Lysis စနစ်) ကို တိုက်ရိုက်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။
လျှောက်လွှာ
အရည်အသွေးကောင်းမွန်သော PCR နှင့် အရေအတွက်အားဖြင့် သန့်စင်ထားသော ပုံစံများ နှင့် သန့်စင်မှုမရှိသော ပုံစံများကို ရှာဖွေတွေ့ရှိခြင်း။
အရည်အသွေးထိန်းချုပ်မှု
1. Exogenous nuclease လုပ်ဆောင်ချက်ကို မတွေ့ပါ။
2.PCR နည်းလမ်းသည် host မပါဘဲကျန်ရှိသော genomic DNA ကိုရှာဖွေပါ။
3. ၎င်းသည် လူ့ Genome ရှိ single-copy genes ကို ထိရောက်စွာ ချဲ့နိုင်သည်။
4. အခန်းအပူချိန်တွင် တစ်ပတ်ကြာ သိမ်းဆည်းထားပါ၊ ထူးခြားသောလုပ်ဆောင်ချက်ပြောင်းလဲမှုများ
ထုတ်ကုန်အသေးစိတ်- https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/
တင်ချိန်- ဇူလိုင်- ၀၇-၂၀၂၂