မင်းဘယ်လောက်သိလဲ။

N အကြောင်းucleic acid ထုတ်ယူခြင်း။

သန့်စင်ထားသော nucleic acid ၏အစနှင့်အဆုံး

အစတွင်အရာအားလုံးခက်ခဲသည်၊ သန့်စင်သော nucleic acid သည်အများဆုံးဖြစ်သည်။

နောက်ဆက်တွဲစမ်းသပ်မှုများအတွက် မော်လီကျူးစမ်းသပ်မှုများ စတင်ခြင်း။

အောင်မြင်မှု သို့မဟုတ် ကျရှုံးမှုသည် အရေးကြီးသော သက်ရောက်မှုရှိသည်။

Trace/ultra-trace UV spectrophotometer ကို သိပ္ပံသုတေသီများစွာက နှစ်သက်သဘောကျကြပြီး nucleic acid အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် ပရိုတင်းနှင့် ဆားအိုင်းယွန်းအကြွင်းအကျန်များကို ရိုးရှင်းစွာ၊ လျင်မြန်စွာနှင့် စီးပွားရေးအရ သိရှိနိုင်သောကြောင့်ဖြစ်သည်။

အားလုံးသိကြသည့်အတိုင်း A260 ဆိုသည်မှာ nucleic acid absorbance OD value၊ A280 သည် protein concentration absorbance OD value၊ A230 သည် ဆား ion concentration absorbance OD value ဖြစ်သည်၊ ထို့ကြောင့် A260 သည် nucleic acid concentration အဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲနိုင်သည်၊ A260/280 သည် protein residue၊ A260/230 ဆိုသည်မှာ ဆား ion residue ဖြစ်သည်၊ သို့သော် သုတေသနပြုလုပ်သူများ၏ အရေအတွက်အရ တိုင်းတာခြင်းမှာ စည်းမျဉ်းတစ်ခုသာဖြစ်သည်"သမားရိုးကျ” DNA နှင့် RNA ၏ သန့်ရှင်းမှုကို ရှင်းပြနိုင်သည်ဟု ယုံကြည်သည်။အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ.၎င်းသည် nucleic acid အထွက်နှုန်းနှင့် သန့်ရှင်းစင်ကြယ်မှုကို ဖော်ထုတ်ရန်အတွက် တစ်ခုတည်းသောစံမဟုတ်ပါ၊ ၎င်းကို အကိုးအကားအဖြစ်သာ အသုံးပြုပြီး ၎င်းသည် "ရွှေစံနှုန်း" မဟုတ်ပါ။

Thermo Fisher ND-2000 လက်စွဲသည် စမ်းသပ်မှုရလဒ်များ၏ ယုံကြည်စိတ်ချရမှုကို အလေးပေးဖော်ပြသည်။

အကြောင်းရင်းမှာ micro/ultramicro UV spectrophotometer ကို အသုံးပြု၍ ရရှိသော ရလဒ်များသည် ဘေးထွက်မှ nucleic acid ၏ အထွက်နှုန်းနှင့် သန့်စင်မှုကိုသာ ထင်ဟပ်ပြီး သြဇာလွှမ်းမိုးမှုရှိသော အကြောင်းရင်းများစွာ (အလင်းလမ်းကြောင်း၊ နမူနာထုထည်၊ နမူနာအာရုံစူးစိုက်မှု၊ pH တန်ဖိုး၊ စုပ်ယူမှုတိုင်းတာမှုအပေါ် သက်ရောက်မှုရှိသော အခြားအိုင်းယွန်းများ)၊ တိုင်းတာထားသော OD တန်ဖိုးသည် တိကျသေချာပေါက် တိကျမည်မဟုတ်ပါ။တစ်ချိန်တည်းမှာပင်၊ စုပ်ယူမှုတန်ဖိုးသတ်မှတ်ခြင်းဆိုင်ရာပစ္စည်း၏ တိကျမှုမရှိခြင်းကြောင့်၊ ကြိုးတစ်ချောင်းတည်း DNA၊ ကြိုးနှစ်ထပ် DNA၊ RNA၊ dNTPs နှင့် အချို့သောပရိုတင်းများအားလုံးသည် လှိုင်းအလျား 260nm တွင် စုပ်ယူမှုအထွတ်အထိပ်ရှိကြပြီး A260 တစ်ခုတည်းမှ ဆုံးဖြတ်သည့် စူးစိုက်မှုသည် စစ်မှန်သော DNA သို့မဟုတ် RNA မဟုတ်ပါ။အာရုံစူးစိုက်မှု၊ သမာဓိနှင့် ဆုတ်ယုတ်မှုတို့ကို အကဲဖြတ်၍မရနိုင်ပါ။

ထို့ကြောင့် ကျွန်ုပ်တို့၏ သန့်စင်ထားသော nucleic acid ၏ အရည်အသွေးကို မည်သို့စီရင်မည်နည်း။ထောက်လှမ်းရန်အတွက် micro/ultramicro UV spectrophotometer အပြင်၊ agarose gel electrophoresis ကဲ့သို့သော နည်းလမ်းများသည် nucleic acid ၏ သန့်ရှင်းမှုနှင့် ခိုင်မာမှုကို အမြင်အာရုံဖြင့် ပြသရန်နှင့် အာရုံစူးစိုက်မှုကို အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ ဖော်ပြရန် လိုအပ်ပါသည်။ဤနည်းအားဖြင့် နည်းလမ်းအမျိုးမျိုး၏ ထောက်လှမ်းမှုရလဒ်များမှရရှိသော nucleic acid အထွက်နှုန်းနှင့် သန့်ရှင်းစင်ကြယ်မှုသည် ယုံကြည်စိတ်ချရသည်။

စမ်းသပ်ဇယား နှိုင်းယှဉ်မှု

ကုမ္ပဏီ A ၏ DNA Extraction kits များကို အသုံးပြု၍ H1299 ဆဲလ်များ၏ Genomic DNA ကို ထုတ်ယူခဲ့ပြီး သိသာထင်ရှားသော အညစ်အကြေးများ ညစ်ညမ်းမှုကို တွေ့မြင်ရပြီး OD တန်ဖိုးများ မြင့်မားသည်။

(OD တိုင်းတာမှုတန်ဖိုးနှင့် သက်ဆိုင်ရာ electropherogram)

အကဲဖြတ်ညွှန်းကိန်း

nucleic acid အထွက်နှုန်းနှင့် အရည်အသွေးစစ်ဆေးမှုအတွက် "ရွှေစံ" ရှိပါသလား။

ကျွန်ုပ်တို့သိသလောက်၊ ရိုးရှင်း၊ မြန်ဆန်ပြီး စျေးသက်သာသောနည်းလမ်းမရှိပါ။၎င်းသည် spectrophotometer၊ gel electrophoresis သို့မဟုတ် mass spectrometry ပဲဖြစ်ဖြစ်၊ ၎င်းတို့အားလုံးသည် မတူညီသော ရှုထောင့်များမှ ဖြေရှင်းချက်တွင် nucleic acid ၏ စူးစိုက်မှုနှင့် သန့်စင်မှုကို ထင်ဟပ်ပြီး အပြန်အလှန် ရည်ညွှန်းခြင်းဖြင့် စီရင်ရန် လိုအပ်ပါသည်။

အကောင်းဆုံး အကဲဖြတ်ညွှန်းကိန်းသည် အမြဲတမ်းဖြစ်သည်။နောက်ဆက်တွဲစမ်းသပ်မှုလျှောက်လွှာ.ပြောင်းပြန်ကူးယူခြင်းနှင့် PCR ချဲ့ထွင်ခြင်း၏ ထိရောက်မှုကို မထိခိုက်စေပါ။ယုံကြည်စိတ်ချရသော ချဲ့ထွင်ခြင်း ထုတ်ကုန်များနှင့် Ct တန်ဖိုးများကို ရယူခြင်း၊ စီစစ်ခြင်းဖြင့် ပြီးပြည့်စုံသော sequence ရရှိခြင်းသည် nucleic acid ထုတ်ယူခြင်းကို အောင်မြင်ပါသည်။

နိဂုံးချုပ်ရလျှင် အချိုး-သီးသန့်သီအိုရီ၏အမြင်သည် "ကောင်းမွန်သော အောက်ပိုင်းစမ်းသပ်မှုရလဒ်များကို ကောင်းမွန်သောထုတ်ယူမှုကန့်သတ်ချက်များအဖြစ်အသုံးပြုခြင်း" ဟူသောအမြင်ဖြင့် စိန်ခေါ်သင့်ပါသည်။

မြင့်မားသော DNA/RNA သန့်စင်မှုကို ရရှိရန် အကြံပြုထားသော Foregene DNA RNA ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာများ

https://www.foreivd.com/reagent/dna-isolation-series/

https://www.foreivd.com/reagent/rna-isolation-series/