mRNA ကာကွယ်ဆေးဆိုတာဘာလဲ
mRNA ကာကွယ်ဆေးသည် သက်ဆိုင်ရာဗီထရိုတွင် ပြုပြင်မွမ်းမံပြီးနောက် ပရိုတိန်းအန်တီဂျန်များကို ဖော်ပြရန်နှင့် ထုတ်လုပ်ရန်အတွက် RNA ကို ခန္ဓာကိုယ်ဆဲလ်များထံ လွှဲပြောင်းပေးကာ ခန္ဓာကိုယ်မှ ခုခံအားတုံ့ပြန်မှုတစ်ခုထုတ်ပေးရန် တွန်းအားပေးကာ ခန္ဓာကိုယ်၏ခုခံအားစွမ်းရည်ကို မြှင့်တင်ပေးသည်။[၁၊၃].
ပုံ 1- mRNA ကာကွယ်ဆေးတိုက်ရိုက်ထိုးသွင်းခြင်း၏အကျိုးသက်ရောက်မှု ဇယားကွက် [2]
mRNA ကာကွယ်ဆေးများ အမျိုးအစားခွဲခြားခြင်း။
mRNA ကာကွယ်ဆေးများကို အမျိုးအစား နှစ်မျိုးခွဲထားသည်။ထပ်တူမကျသောmRNA နှင့်မိမိကိုယ်ကို ချဲ့ထွင်ခြင်း။mRNA- ချဲ့ထွင်ခြင်း mRNA သည် ပစ်မှတ်အန်တီဂျင်ကို ကုဒ်လုပ်ရုံသာမက ဆဲလ်အတွင်း RNA ချဲ့ထွင်ခြင်းနှင့် ပရိုတင်းဖော်ပြမှုယန္တရားတို့ကို လုပ်ဆောင်နိုင်စေသည့် ပွားခြင်းကို ကုဒ်လုပ်သည်။ပုံတူပွားမဟုတ်သော mRNA ကာကွယ်ဆေးများသည် ပစ်မှတ်အန်တီဂျင်များကိုသာ ကုဒ်လုပ်ထားပြီး 5' နှင့် 3' ဘာသာပြန်မထားသော ဒေသများ (UTR) ပါရှိသည်။၎င်းတို့သည် လိုက်လျောညီထွေရှိမှုနှင့် မွေးရာပါကိုယ်ခံစွမ်းအားကို ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် လှုံ့ဆော်ပေးသည်၊ အမည်ရသည့် situ antigen expression နှင့် အန္တရာယ်အချက်ပြထုတ်လွှင့်မှုတွင် အောက်ပါအပလီကေးရှင်းများ အင်္ဂါရပ်များရှိသည်။[၂၊၃]
● လိုက်လျောညီထွေရှိမှုနှင့် မွေးရာပါကိုယ်ခံစွမ်းအားကို ကျယ်ကျယ်ပြန့်ပြန့် လှုံ့ဆော်ပေးစွမ်းနိုင်သည်၊ ဆိုလိုသည်မှာ situ antigen ဖော်ပြမှုနှင့် အန္တရာယ်အချက်ပြထုတ်လွှင့်မှုတွင်၊
● ဟာသနှင့် ဆဲလ်လူလာအကျိုးသက်ရောက်မှုများနှင့် ကိုယ်ခံအားမှတ်ဉာဏ်အပါအဝင် "ဟန်ချက်ညီသော" ခုခံအားတုံ့ပြန်မှုကို လှုံ့ဆော်ပေးနိုင်သည်။
● ကာကွယ်ဆေးထုတ်လုပ်ရာတွင် ရှုပ်ထွေးမှုမတိုးစေဘဲ မတူညီသော antigens များကို ပေါင်းစပ်နိုင်သည်။
● ထပ်ခါတလဲလဲ ကာကွယ်ဆေးထိုးခြင်းဖြင့် ကိုယ်ခံအားအလားအလာကို အဆက်မပြတ်တိုးတက်စေနိုင်ပြီး သယ်ဆောင်သူအား ခုခံအားတုံ့ပြန်မှု အနည်းငယ်မျှ သို့မဟုတ် အနည်းငယ်မျှ မရှိပါ။
● အပူချိန်တည်ငြိမ်သော mRNA ကာကွယ်ဆေးများသည် ကာကွယ်ဆေးများ၏ သယ်ယူပို့ဆောင်ရေးနှင့် သိုလှောင်မှုကို ရိုးရှင်းစေသည်။
ပုံ 2- mRNA ကာကွယ်ဆေး၏ ဇယားကွက်နှင့် ၎င်း၏ antigen ဖော်ပြမှု ယန္တရား [4]
mRNA ကာကွယ်ဆေး၏အင်္ဂါရပ်များ
သမားရိုးကျ ကာကွယ်ဆေးများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက mRNA ကာကွယ်ဆေးများသည် ရိုးရှင်းသော ထုတ်လုပ်မှု လုပ်ငန်းစဉ်များ၊ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှု မြန်ဆန်ခြင်း၊ ဆဲလ်ယဉ်ကျေးမှုအတွက် မလိုအပ်ဘဲ၊ ကုန်ကျစရိတ် သက်သာပါသည်။DNA ကာကွယ်ဆေးများနှင့် နှိုင်းယှဉ်ပါက mRNA ကာကွယ်ဆေးများသည် နျူကလီးယပ်အတွင်းသို့ ဝင်ရောက်ရန် မလိုအပ်ဘဲ အိမ်ရှင်ဂျီနိုမ်သို့ ပေါင်းစည်းရန် အန္တရာယ်မရှိပါ။ပြုပြင်မွမ်းမံခြင်းဖြင့် တစ်ဝက်သက်တမ်းကို ချိန်ညှိနိုင်သည်။
ဇယား 1- mRNA ကာကွယ်ဆေးများ၏ အားသာချက်များနှင့် အားနည်းချက်များ
|
| အားသာချက် | ချို့ယွင်းချက် |
| mRNA ကာကွယ်ဆေး | လျင်မြန်သော သုတေသနနှင့် ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်ရေး ၊ ကာကွယ်ဆေး ထုတ်လုပ်ရန် ရက် ၄၀ သာ ကြာပါသည်။ | မလိုအပ်သော ခုခံအား တုံ့ပြန်မှုကို ဖြစ်ပေါ်စေသည်။
|
| mRNA သည် ဇီဝကမ္မအခြေအနေများအောက်တွင် မတည်မငြိမ်ဖြစ်ပြီး ပျက်စီးရန်လွယ်ကူသည်။ | ဖြစ်နိုင်ချေရှိသော ကုထုံးဆိုင်ရာ ဗီဇပြောင်းလဲမှုများကို ရှောင်ရှားရန် ဂျီနိုအာတွင် ပေါင်းစည်းမည်မဟုတ်ပါ။
| |
| မည်သည့်နျူကလီးယားဒေသခံအချက်ပြ၊ စာသားမှတ်တမ်းအတွက်မလိုအပ်ပါ။ | ဘေးကင်းလုံခြုံရေးနျူကလီးယား၏ထိရောက်မှုကိုအတည်ပြုရန်နေဆဲဖြစ်သည်။
|
ပုံ 3- mRNA ကာကွယ်ဆေးထုတ်လုပ်မှုနှင့် ပြင်ဆင်မှု စီးဆင်းမှုဇယား [4]
Foregene Viral RNA Isolation အစုံ
RT-qPCR လွယ်ကူသော (တစ်လှမ်း)
mRNA ကာကွယ်ဆေးများ ပြင်ဆင်မှုအတွက် ပိုမိုကောင်းမွန်သော ဗျူဟာများ
mRNA ကိုယ်တိုင်၏ တည်ငြိမ်မှု အားနည်းခြင်း၊ တစ်ရှူးများရှိ နျူကလီးယားများ လွယ်ကူစွာ ပြိုကွဲခြင်း၊ ဆဲလ်ဝင်ရောက်မှု ထိရောက်မှု နည်းပါးခြင်းနှင့် ဘာသာပြန်ခြင်း ထိရောက်မှု နည်းပါးခြင်းတို့ကြောင့် အဆိုပါ ချို့ယွင်းချက်များသည် mRNA ကာကွယ်ဆေးများ အသုံးပြုမှုကို ကန့်သတ်ထားသည်။ဘာသာပြန်ခြင်းစွမ်းဆောင်ရည်သည်လည်း အလွန်အရေးပါသောအခန်းကဏ္ဍမှ ပါဝင်ပါသည်။ပို့ဆောင်ရေးယာဉ်များကို ဗိုင်းရပ်စ်ပိုးမွှားများနှင့် ဗိုင်းရပ်စ်မဟုတ်သော ပိုးမွှားများ ( liposomes၊ liposomes မဟုတ်သော၊ ဗိုင်းရပ်စ်များ၊ နာနိုအမှုန်များ စသည်ဖြင့်) ဟူ၍ ခွဲခြားနိုင်သည်။ထို့ကြောင့် သက်ဆိုင်ရာ တိုးတက်မှု အစီအမံများ လိုအပ်ပါသည်။အောက်ဖော်ပြပါသည် mRNA ပြင်ဆင်မှုအတွက် ဆေးဝါးဗေဒဆိုင်ရာ တိုးတက်မှုဗျူဟာဖြစ်သည်။[2]
1 ဦးထုပ် analogs များကို ပေါင်းစပ်ခြင်း သို့မဟုတ် mRNA ကို တည်ငြိမ်စေရန်နှင့် eukaryotic ဘာသာပြန်မှု စတင်ခြင်းအချက် 4E (EIF4E) နှင့် ချိတ်ဆက်ခြင်းဖြင့် ပရိုတင်းဘာသာပြန်ခြင်းကို တိုးမြှင့်ရန် capping အင်ဇိုင်းများကို အသုံးပြုပါ
2 mRNA တည်ငြိမ်စေရန်နှင့် ပရိုတင်းဘာသာပြန်ခြင်းကို တိုးမြှင့်ရန် 5′-ဘာသာပြန်မထားသော ဒေသ (UTR) နှင့် 3′-UTR ရှိ ဒြပ်စင်များကို ချိန်ညှိပါ
3 Poly(A) အမြီးကို ပေါင်းထည့်ခြင်းသည် mRNA ကို တည်ငြိမ်စေပြီး ပရိုတင်းဘာသာပြန်ခြင်းကို တိုးစေသည်။
4 မွေးရာပါ ကိုယ်ခံအားတက်ကြွမှုကို လျှော့ချရန်နှင့် ဘာသာပြန်ခြင်းကို တိုးမြှင့်ရန်အတွက် ပြုပြင်ထားသော nucleosides
5 RNase III နှင့် အမြန်ပရိုတင်းအရည် chromatography (FPLC) သန့်စင်မှုဖြင့် ကုသမှုသည် ခုခံအားတက်ကြွမှုကို လျှော့ချနိုင်ပြီး ဘာသာပြန်ခြင်းကို တိုးစေနိုင်သည်။
6 ဘာသာပြန်ခြင်းကို တိုးမြှင့်ရန် အတွဲများ သို့မဟုတ် ကော်ဒွန်များကို ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ပါ။
7 ဘာသာပြန်ခြင်းစတင်ခြင်းဆိုင်ရာအချက်များနှင့် ဘာသာပြန်ခြင်းနှင့် ကိုယ်ခံအားစနစ်ကိုပြောင်းလဲရန် အခြားနည်းလမ်းများကို ပူးတွဲပေးပို့ခြင်း။
ပုံ 4- In vitro transcription (IVT) mRNA ထုတ်လုပ်မှုနှင့် တပ်ဆင်ခြင်း လုပ်ငန်းစဉ် [5]
plasmid DNA ၏အကြီးစားပြင်ဆင်မှု
Plasmid DNA သန့်စင်ခြင်းသည် အဓိကအားဖြင့် RNA၊ စက်ဝိုင်းဖွင့် DNA endotoxin၊ host protein နှင့် host nucleic acid ကဲ့သို့သော ညစ်ညမ်းမှုများကို အဓိကဖယ်ရှားပေးပြီး အများအားဖြင့် recombinant plasmid ကို E. coli အဖြစ်သို့ ပြောင်းလဲပေးပါသည်။E. coli သည် သိပ်သည်းဆမြင့်မားသော စော်ဖောက်ခြင်းကို ခံယူရပြီး၊ ထို့နောက် အစိုင်အခဲ-အရည်များကို ခွဲထုတ်ကာ အီးကိုလီ စုစည်းမှုဖြစ်သည်။ထို့နောက် E. coli သည် အယ်ကာလိုင်း lysis၊ lysis ပြီးနောက် centrifugal အစိုင်အခဲ-အရည် ခွဲခြားမှုနှင့် microfiltration ရှင်းလင်းမှု၊ ရှင်းလင်းမှုပြီးနောက် ultrafiltration နှင့် အာရုံစူးစိုက်မှုတို့ကို ခံယူပြီးနောက်၊ ထို့နောက် chromatographic သန့်စင်မှုကို ခံယူသည်။
ပလတ်စမစ် DNA ကို သန့်စင်ခြင်း-
Foregene အထွေထွေ Plasmid Mini Kit
【၁【苗鹤凡, 郭勇, 江新香.mRNA疫苗研究进展及挑战[ည]။免疫学杂志၊ 2016(05:446-449)။
【၂】Pardi N, Hogan MJ, Porter FW, et al.mRNA ကာကွယ်ဆေး — ကာကွယ်ဆေးပညာခေတ်သစ်[J]။မူးယစ်ဆေးဝါး ရှာဖွေတွေ့ရှိမှု၊ 2018၊
【၃】Kramps T., Elbers K. (2017) RNA Vaccines မိတ်ဆက်။တွင်- Kramps T., Elbers K. (eds) RNA ကာကွယ်ဆေးများ။မော်လီကျူလာဇီဝဗေဒဆိုင်ရာ နည်းလမ်းများ အတွဲ ၁၄၉၉။ Humana Press, New York, NY။
【၄】Maruggi G၊ Zhang C၊ Li J et al.mRNA သည် ကူးစက်ရောဂါများကို ထိန်းချုပ်ရန် ကာကွယ်ဆေးဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုအတွက် အသွင်ပြောင်းနည်းပညာတစ်ခုအနေဖြင့်[J]။မော်လီကျူးကုထုံး၊ 2019။
【5】Sergio Linares-Fernández၊ Céline Lacroix၊၊ ၊ mRNA ကာကွယ်ဆေးကို စက်ချုပ်ခြင်း/ အလိုက်သင့်ခံနိုင်ရည်တုံ့ပြန်မှုကို ဟန်ချက်ညီစေရန်၊ မော်လီကျူးဆေးပညာဆိုင်ရာ လမ်းကြောင်းများ၊ အတွဲ 26၊ စာစောင် 3,2020၊ စာမျက်နှာ 311-323။
စာတိုက်အချိန်- သြဂုတ်-၀၅-၂၀၂၁
