-
တိရိစ္ဆာန်တစ်ရှူးတိုက်ရိုက် PCR ကိရိယာအစုံ - UNG
ဤကိရိယာသည် PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက်တိရိစ္ဆာန်တစ်ရှူးများမှ Genomics DNA ကိုလျင်မြန်စွာလွှတ်ပေးရန်အတွက်ထူးခြားသော lysis buffer system ကိုအသုံးပြုသည်။ ထို့ကြောင့်၎င်းသည်အကြီးစားမျိုးဗီဇစစ်ဆေးခြင်းအတွက်အထူးသင့်လျော်သည်။
lysis ကြားခံမှ Genomics DNA ကိုထုတ်လွှတ်မှုလုပ်ငန်းစဉ်ကို ၆၅ မိနစ် ၁၀ မှ ၃၀ အတွင်းပြီးစီးသည်°C. ပရိုတိန်းနှင့် RNA ဖယ်ရှားခြင်းကဲ့သို့သောအခြားလုပ်ငန်းစဉ်များမလိုအပ်ပါ။ ထုတ်လွှတ်ထားသောသဲလွန်စ DNA ကို PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက် template အဖြစ်အသုံးပြုနိုင်သည်။
2×လွယ်ကူစွာ PCRTM Mix (UNG) သည်အခြေခံအားဖြင့် dTTP အစား dUTTP အစား 2 ကိုအခြေခံသည်×လွယ်ကူစွာ PCRTM ရောနှောထည့်ပြီး UNG အင်ဇိုင်း (Uracil-N-glycosylase) ကိုပေါင်းထည့်ပြီး dUTP ပါ ၀ င်သည့် template ကိုတစ်ချိန်တည်းတွင်ပျက်စီးစေနိုင်သည်။ PCR တုံ့ပြန်မှုမတိုင်မီတွင် uracil ပါ ၀ င်သည့် PCR ထုတ်ကုန်ကို UNG အင်ဇိုင်းကိုအသုံးပြုရန်အသုံးပြုသည်။ UNG အင်ဇိုင်းသည် uracil မပါ ၀ င်သော template ပေါ်တွင်မည်သည့်အကျိုးသက်ရောက်မှုမျှရှိလိမ့်မည်မဟုတ်ဘဲကြီးမားသောမျိုးရိုးဗီဇဆိုင်ရာစမ်းသပ်မှုများအတွင်း PCR ထုတ်ကုန်များညစ်ညမ်းမှုဖြစ်နိုင်ချေကိုကာကွယ်ခြင်းနှင့်တိကျစွာသေချာစေခြင်းတို့ဖြစ်သည်။
D-Taq DNA polymerase သည် Forerene မှတိုက်ရိုက် PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက်တီထွင်ခဲ့သော DNA polymerase ဖြစ်သည်။ D-Taq DNA polymerase သည်အမျိုးမျိုးသောရှုပ်ထွေးသောတုံ့ပြန်မှုအားတားဆီးနိုင်သည့်အမျိုးမျိုးသောရှုပ်ထွေးသောတုံ့ပြန်မှုစနစ်များရှိ PCR တုံ့ပြန်မှုတားစီးမှုများကိုအလွန်သည်းခံနိုင်ပြီးတိုက်ရိုက် PCR တုံ့ပြန်မှုအတွက်အထူးသင့်လျော်သော 2Kb / min သို့ရောက်ရှိနိုင်သည်။
