page_banner

Cell Direct RT qPCR Kit—SYBR GREEN I

Kit ဖော်ပြချက်-

◮ ရိုးရှင်းပြီး ထိရောက်မှုရှိသည်။Cell Direct RT နည်းပညာဖြင့် RNA နမူနာများကို 7 မိနစ်အတွင်း ရရှိနိုင်သည်။

နမူနာလိုအပ်ချက်သည် သေးငယ်သည်၊ ဆဲလ် 10 ခုအထိ စမ်းသပ်နိုင်သည် ။

◮ မြင့်မားသော စီးဆင်းမှု: ၎င်းသည် 384၊ 96၊ 24၊ 12၊ 6 တွင်းပြားများတွင် မွေးမြူထားသောဆဲလ်များတွင် RNA ကို လျင်မြန်စွာသိရှိနိုင်သည်။

DNA Eraser သည် ထုတ်လွှတ်သော မျိုးရိုးဗီဇများကို လျင်မြန်စွာ ဖယ်ရှားနိုင်ပြီး၊ နောက်ဆက်တွဲ စမ်းသပ်မှုရလဒ်များအပေါ် သက်ရောက်မှုကို များစွာလျှော့ချနိုင်သည်။

ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ထားသော RT နှင့် qPCR စနစ်သည် နှစ်ဆင့် RT-PCR ပြောင်းပြန်စာသားကို ပိုမိုထိရောက်စေပြီး PCR သည် ပိုမိုတိကျပြီး RT-qPCR တုံ့ပြန်မှုတားဆေးများကို ပိုမိုခံနိုင်ရည်ရှိစေသည်။

foregene strength


ထုတ်ကုန်အသေးစိတ်

ထုတ်ကုန်အမှတ်အသား

အမြဲမေးလေ့ရှိသောမေးခွန်းများ

ဖော်ပြချက်

ဤကိရိယာသည် RT-qPCR တုံ့ပြန်မှုများအတွက် ယဉ်ကျေးမှုဆိုင်ရာဆဲလ်နမူနာများမှ RNA ကို လျင်မြန်စွာထုတ်လွှတ်ပေးနိုင်သည့် ထူးခြားသော lysis ကြားခံစနစ်ကို အသုံးပြုထားပြီး၊ ထို့ကြောင့် အချိန်ကုန်ပြီး ပင်ပန်းခက်ခဲသော RNA သန့်စင်မှုလုပ်ငန်းစဉ်ကို ဖယ်ရှားပေးပါသည်။RNA နမူနာပုံစံကို 7 မိနစ်အတွင်း ရရှိနိုင်သည်။၅×Direct RT Mix နှင့် ၂×အစုံလိုက်မှ ပံ့ပိုးပေးသော တိုက်ရိုက် qPCR Mix-SYBR ဓာတ်ပစ္စည်းများသည် အချိန်နှင့်တပြေးညီ အရေအတွက် PCR ရလဒ်များကို လျင်မြန်ထိရောက်စွာ ရရှိနိုင်ပါသည်။

5×Direct RT Mix နှင့် ၂×Direct qPCR Mix-SYBR တွင် ပြင်းထန်သော inhibitor ခံနိုင်ရည်ရှိပြီး နမူနာများ၏ lysate ကို RT-qPCR အတွက် နမူနာပုံစံအဖြစ် တိုက်ရိုက်အသုံးပြုနိုင်ပါသည်။ဤကိရိယာတွင် ထူးခြားသော RNA မြင့်မားသောဆက်စပ်မှုရှိသော Foregene reverse transcriptase နှင့် Hot D-Taq DNA polymerase၊ dNTPs၊ MgCl တို့ပါရှိသည်။2တုံ့ပြန်မှုကြားခံ၊ PCR ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်လုပ်ဆောင်ခြင်းနှင့် တည်ငြိမ်မှု။

သတ်မှတ်ချက်များ

၂၀၀×20μl Rxns, 1000×20μl Rxns

Kit အစိတ်အပိုင်းများ

အပိုင်း

ကြားခံ CL

Foregene Protease Plus II

ကြားခံ ST

ဒုတိယပိုင်း

DNA ခဲဖျက်

5× တိုက်ရိုက် RT ရောနှောခြင်း။

2× တိုက်ရိုက် qPCR ရောနှော-SYBR

50× ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး

RNase-Free ddH2O

ညွှန်ကြားချက်များ

အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ

ရိုးရှင်းပြီး ထိရောက်မှု - Cell Direct RT နည်းပညာဖြင့် RNA နမူနာများကို 7 မိနစ်အတွင်း ရရှိနိုင်သည်။

■ နမူနာလိုအပ်ချက်သည် သေးငယ်သည်၊ ဆဲလ် ၁၀ ခုအထိ စမ်းသပ်နိုင်သည် ။

■ မြင့်မားသောထွက်ရှိမှု- ၎င်းသည် 384၊ 96၊ 24၊ 12၊ 6- well plates များတွင် မွေးမြူထားသောဆဲလ်များတွင် RNA ကို လျင်မြန်စွာသိရှိနိုင်သည်။

■ DNA Eraser သည် ထွက်ရှိလာသော ဂျီနိုမ်များကို လျင်မြန်စွာ ဖယ်ရှားနိုင်ပြီး၊ နောက်ဆက်တွဲ စမ်းသပ်မှုရလဒ်များအပေါ် သက်ရောက်မှုကို များစွာလျှော့ချနိုင်သည်။

■ Optimized RT နှင့် qPCR စနစ်သည် နှစ်ဆင့် RT-PCR ပြောင်းပြန် စာသားကို ပိုမိုထိရောက်စေပြီး PCR သည် ပိုမိုတိကျပြီး RT-qPCR တုံ့ပြန်မှုတားဆေးများကို ပိုမိုခံနိုင်ရည်ရှိစေသည်။

Kit လျှောက်လွှာ

အသုံးချမှုနယ်ပယ်- မွေးမြူထားသောဆဲလ်များ။

- နမူနာ lysis မှထုတ်လွှတ်သော RNA- ဤကိရိယာ၏ RT-qPCR နမူနာပုံစံအတွက်သာ သက်ဆိုင်ပါသည်။

- အစုံအလင်ကို အောက်ပါရည်ရွယ်ချက်များအတွက်အသုံးပြုနိုင်သည်- မျိုးရိုးဗီဇဖော်ပြမှုခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာမှု၊ siRNA-mediated gene silencing effect၊ ဆေးစစ်ခြင်းစသည်ဖြင့်။

ပုံကြမ်း

Cell Direct RT qPCR diagram

သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း

ဤကိရိယာ၏ အပိုင်း I ကို 4 ℃ တွင် သိမ်းဆည်းသင့်သည်။Part II ကို -20 ℃ တွင် သိမ်းဆည်းသင့်ပါသည်။

 Foregene Protease Plus II ကို 4 တွင်သိမ်းဆည်းသင့်သည်။℃၊ -20 ℃ တွင် အေးခဲမနေပါနှင့်။

 ဓာတ်ပစ္စည်း ၂×တိုက်ရိုက် qPCR Mix-SYBR ကို -20 တွင်သိမ်းဆည်းသင့်သည်။အမှောင်ထဲမှာ;မကြာခဏအသုံးပြုပါက 4 တွင်သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။ရေတို သိုလှောင်မှု အတွက် ℃ (10 ရက်အတွင်း အသုံးပြုရန်)။


  • ယခင်-
  • နောက်တစ်ခု:

  • Real Time PCR primer ဒီဇိုင်းအခြေခံမူ

    ရှေ့သို့ Primer နှင့် Reverse Primer

    Real Time PCR အတွက်၊ primer ဒီဇိုင်းသည် အလွန်အရေးကြီးပါသည်။Primers များသည် PCR amplification ၏ တိကျမှုနှင့် ထိရောက်မှုတို့နှင့် ဆက်စပ်နေပြီး အောက်ပါအခြေခံမူများကို ကိုးကား၍ ဒီဇိုင်းထုတ်နိုင်သည်။

    Primer အရှည်- 18-30bp။

    GC ပါဝင်မှု- 40-60%။

    Tm တန်ဖိုး- Primer 5 ကဲ့သို့သော Primer ဒီဇိုင်းဆော့ဖ်ဝဲသည် primer ၏ Tm တန်ဖိုးကို ပေးနိုင်သည်။အထက်ပိုင်းနှင့် အောက်ပိုင်း primers များ၏ Tm တန်ဖိုးများသည် တတ်နိုင်သမျှ နီးစပ်သင့်သည်။Tm တွက်ချက်မှုဖော်မြူလာကိုလည်း သုံးနိုင်သည်- Tm = 4°C (G + C) + 2°C (A + T)။PCR ကိုလုပ်ဆောင်သောအခါ၊ primer Tm တန်ဖိုး 5°C အောက်ရှိ အပူချိန်ကို annealing temperature အဖြစ် ယေဘူယျအားဖြင့် ရွေးချယ်သည် (သက်ဆိုင်ရာ အပူချိန်တိုးလာခြင်းသည် PCR တုံ့ပြန်မှု၏ တိကျမှုကို တိုးလာစေသည်)။

    Primers နှင့် PCR ထုတ်ကုန်များ

    ဒီဇိုင်း primer PCR amplification ထုတ်ကုန်အရှည်သည် 100-150bp ပိုကောင်းသည်။

    ပုံစံပလိတ်၏ အလယ်တန်းဖွဲ့စည်းပုံဆိုင်ရာ ဧရိယာရှိ ဒီဇိုင်း primer များကို တတ်နိုင်သမျှ ရှောင်ရှားသင့်သည်။

    အထက်ပိုင်းနှင့် မြစ်အောက်ပိုင်း ပရိုမိုးရှင်းများ၏ 3′ စွန်းများကြားတွင် ဖြည့်စွက်အခြေ 2 ခု သို့မဟုတ် ထို့ထက်ပို၍ဖွဲ့စည်းခြင်းကို ရှောင်ကြဉ်ပါ။

    Primer 3′ terminal base သည် နောက်ထပ် 3 ဆက်တိုက် G သို့မဟုတ် C ဖြင့် မတည်ရှိနိုင်ပါ။

    Primers များသည် ၎င်းတို့ကိုယ်တိုင် ဖြည့်စွက်ဖွဲ့စည်းပုံများ မပါဝင်နိုင်ပါ၊ သို့မဟုတ်ပါက ဆံညှပ်ဖွဲ့စည်းပုံသည် PCR ချဲ့ထွင်မှုကို ထိခိုက်စေပါသည်။

    ATCG ကို primer sequence တွင်တတ်နိုင်သမျှအညီအမျှဖြန့်ဝေသင့်ပြီး 3′ terminal base ကို T အဖြစ်ရှောင်ရှားသင့်သည်။

    နောက်ဆက်တွဲ 1:Cell Direct RT-qPCR Kit အစိတ်အပိုင်း ဖြည့်စွက်စာထုပ်

    1.Cell Lysis ဖြေရှင်းချက်


    Cell Lysis ဖြေရှင်းချက်

    Kit အစိတ်အပိုင်းများ

    (24-well lysis system/ well)၊

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 T

    500 T

    အပိုင်းငါ

    ကြားခံ CL

    20 ml

    100 ml

    Foregene Protease Plus II

    400 μl

    1 ml × 2

    ကြားခံ ST

    1 ml × 2

    10 ml

    အပိုင်းII

    DNA ခဲဖျက်

    400 μl

    1 ml × 2

    2.RT ရောသမမွှေပါ။


    RT ရောသမမွှေပါ။

    Kit အစိတ်အပိုင်းများ

    (20 μl တုံ့ပြန်မှုစနစ်)

    DRT-01011-B1

    200 T

    5× တိုက်ရိုက် RT ရောနှောခြင်း။

    800 μl

    RNase-Free ddH2O

    1.7 ml × 2

     

    3.qPCR ရောသမမွှေပါ။


    qPCR ရောနှောခြင်း။

    Kit အစိတ်အပိုင်းများ

    (20 μl တုံ့ပြန်မှုစနစ်)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 T

    1000 T

    2× တိုက်ရိုက် qPCR ရောနှော-SYBR

    1 ml × 2

    1.7 ml × 6

    50× ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး

    40 μl

    200 μl

    RNase-Free ddH2O

    1.7 ml

    10 ml

    သင့်စာကို ဤနေရာတွင် ရေးပြီး ကျွန်ုပ်တို့ထံ ပေးပို့ပါ။

    ဆက်စပ်ထုတ်ကုန်များ