• facebook
  • linkedin
  • youtube

A260/A230 ၏ နိမ့်သောအချိုးသည် အများအားဖြင့် စုပ်ယူမှုလှိုင်းအလျား 230nm ရှိသည့် အညစ်အကြေးများကြောင့် ဖြစ်တတ်သည်။ဤအညစ်အကြေးများပါဝင်သည်များကိုကြည့်ကြပါစို့။

  • အဖြစ်များသော ညစ်ညမ်းမှုများ

    စုပ်ယူမှုလှိုင်းအလျား

    အချိုးအစားအကျိုးသက်ရောက်မှု

    ပရိုတင်း

    ~ 230nm နှင့် 280nm

    A ကို တပြိုင်နက် လျှော့ချခြင်း၊၂၆၀/A ၂၈၀နှင့် A၂၆၀/A ၂၈၀အချိုးများ

    Guanidine ဆား

    220-240 nm

    A ကိုလျှော့ချပါ။၂၆၀/A ၂၈၀အချိုး

    ဖီနော

    ~270nm

    -

    Trizol

    ~ 230nm နှင့် 270nm

    A ကိုလျှော့ချပါ။၂၆၀/A ၂၈၀အချိုး

    EDTA

    ~230nm

    A ကိုလျှော့ချပါ။၂၆၀/A ၂၈၀အချိုး

    အီသနော

    230-240 nm

    A ကိုလျှော့ချပါ။၂၆၀/A ၂၈၀အချိုး

 
 
 
ဘုံညစ်ညမ်းမှုများ၏ စုပ်ယူမှုလှိုင်းအလျားနှင့် ဆန့်ကျင်ဘက်တန်ဖိုး

Protein ညစ်ညမ်းခြင်း။
ပရိုတင်း ညစ်ညမ်းမှုသည် နူကလိစ်အက်ဆစ် ထုတ်ယူခြင်း လုပ်ငန်းစဉ်တွင် အဖြစ်အများဆုံး ညစ်ညမ်းမှုအဖြစ် မှတ်ယူနိုင်ပါသည်။ပရိုတင်းသည် အပေါ်ပိုင်းနှင့် အောက်ပိုင်းကြားတွင် ရှိနေသည်။အော်ဂဲနစ်အဆင့်လေထုညစ်ညမ်းမှုသည် A260/A280 နှင့် A260/A230 အချိုးကို တစ်ချိန်တည်းတွင် လျှော့ချမည်ဖြစ်ပြီး A260/A230 အချိုးသည် A260/A280 အချိုးထက် ပိုသိသာစွာ ပြောင်းလဲသွားမည်ဖြစ်သည်။
နောက်ဆက်တွဲကာလအတွင်းပြောင်းပြန် စာသားမှတ်တမ်းor qPCR တုံ့ပြန်မှုများ, ပရိုတင်းအကြွင်းအကျန်များသည် အင်ဇိုင်းလုပ်ဆောင်ချက်ကို ဟန့်တားခြင်း သို့မဟုတ် အနှောင့်အယှက်ပေးနိုင်သည်။.ပရိုတိန်းညစ်ညမ်းမှုကို ရှောင်ရှားရန် အကောင်းဆုံးနည်းလမ်းမှာ supernatant ကို လောင်းချသောအခါ “ပိုသည်ထက်နည်းသည်၊ အကြိမ်များစွာ အနည်းငယ်” ဟူသော နိယာမကို သတိရရန်ဖြစ်သည်။

2. Guanidinium ညစ်ညမ်းမှု
hydrochloride (GuHCl) နှင့် guanidine thiocyanate (GTC) တို့သည် nucleic acid ထုတ်ယူသည့် လုပ်ငန်းစဉ်အတွင်း ဆဲလ်အမြှေးပါးများကို လျင်မြန်စွာ ဖျက်ဆီးနိုင်ပြီး ပရိုတင်းဓာတ် လွန်ကဲပြီး မိုးရွာသွန်းမှုကို ဖြစ်စေသည့် ပရိုတင်းများ denaturing အကျိုးသက်ရောက်မှုရှိသည်။GuHCl နှင့် GTC ၏ စုပ်ယူမှုလှိုင်းအလျားသည် 220-240 nm အကြားရှိပြီး၊ကျန်ရှိသော ဂွာနီဒီနီယမ်ဆားသည် A260/A230 အချိုးကို လျှော့ချပေးသည်။.ကျန်နေတဲ့ ဂွာနီဒီနီယမ်ဆား အချိုးအစား လျော့သွားပေမယ့်၊ရေအောက်ပိုင်း စမ်းသပ်မှုများအပေါ် သက်ရောက်မှုသည် အမှန်တကယ်ပင် နည်းပါးသည်။.

3. Trizol ညစ်ညမ်းခြင်း။
Trizol ၏အဓိကအစိတ်အပိုင်းမှာ phenol ဖြစ်သည်။ဖီနော၏အဓိကလုပ်ဆောင်ချက်မှာ ဆဲလ်များအတွင်း lyse လုပ်ပြီး ပရိုတင်းများနှင့် နူကလိယအက်ဆစ်ဒြပ်စင်များကို ဆဲလ်များအတွင်း ထုတ်လွှတ်ရန်ဖြစ်သည်။ဖီနောသည် ပရိုတင်းများကို ထိရောက်စွာ သန့်စင်ပေးနိုင်သော်လည်း၊ ၎င်းသည် RNase လှုပ်ရှားမှုကို လုံးလုံးလျားလျား ဟန့်တားနိုင်မည်မဟုတ်ပေ။ထို့ကြောင့်၊ 8 -hydroxyquinoline ၊ guanidine isothiocyanate ၊ β-mercaptoethanol စသည်တို့သည် endogenous နှင့် exogenous RNase ကိုတားစီးရန် TRIzol တွင်ထည့်သွင်းထားသည်။
ဆဲလ်လူလာ RNA ကို ထုတ်ယူသောအခါ၊ Trizol သည် ဆဲလ်များကို လျင်မြန်စွာ lyse လုပ်ပြီး ဆဲလ်များမှ ထွက်လာသော nuclease ကို ဟန့်တားနိုင်ပြီး ကျန်ရှိသော Trizol သည် A260/A230 အချိုးကို သိသိသာသာ လျှော့ချပေးလိမ့်မည်။
လုပ်ဆောင်ခြင်းနည်းလမ်း- centrifuging လုပ်သောအခါ၊ Trizol ရှိ phenol သည် 4° နှင့် အခန်းအပူချိန်အောက်တွင် ရေအဆင့်တွင် အလွယ်တကူ ပျော်ဝင်နိုင်သည်ကို သတိပြုရပါမည်။

4. Ethanol အကြွင်းအကျန်
အီသနောကို DNA နှင့် ချည်နှောင်ထားနိုင်သော ဆားအိုင်းယွန်းများကို ပျော်ဝင်စေပြီး DNA ကို စုပ်ယူရန် နောက်ဆုံးလုပ်ငန်းစဉ်တွင် အီသနောကို အသုံးပြုသည်။စုပ်ယူမှုလှိုင်းအလျားသည် အမြင့်ဆုံးဖြစ်သည်။စုပ်ယူမှုအထွတ်အထိပ်အီသနောသည် 230-240 nm တွင်လည်း ရှိသည်။A260/A230 အချိုးကိုလည်း လျှော့ချပေးမည်ဖြစ်သည်။.
အီသနောအကြွင်းအကျန်ကို ရှောင်ရှားခြင်းနည်းလမ်းသည် နောက်ဆုံး elution တွင် နှစ်ကြိမ်ထပ်၍ မှုတ်ခြင်း၊မီးခိုးငွေ့ hoodအီသနောကို အပြည့်အ၀အငွေ့ပျံစေရန် နှစ်မိနစ်ကြာ elution အတွက် ကြားခံထည့်ပါ။
သို့သော်လည်း အချိုးသည် RNA အရည်အသွေး၏ အကဲဖြတ်ညွှန်းကိန်းတစ်ခုသာဖြစ်ကြောင်း သိထားသင့်သည်။အထက်ဖော်ပြပါ လုပ်ဆောင်ချက်များကို တင်းတင်းကျပ်ကျပ် စီမံခန့်ခွဲပါက၊ အချိုးနှင့် စံအကွာအဝေးအကြား သွေဖည်မှုသည် ရေစုန်စမ်းသပ်မှုများအပေါ် ကြီးစွာသော သက်ရောက်မှုရှိမည်မဟုတ်ပါ။
ဆက်စပ်ထုတ်ကုန်များ-
တိရစ္ဆာန်စုစုပေါင်း RNA သီးခြားခွဲထုတ်ကိရိယာ
Plant Total RNA Isolation အစုံ
Cell Total RNA Isolation အစုံ
Plant Total RNA Isolation Kit Plus


ပို့စ်အချိန်- Feb-10-2023