Bacterial DNA Isolation Kit ဘက်တီးရီးယားမျိုးရိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူခြင်း သန့်စင်ရေးကိရိယာများ
Kit ဖော်ပြချက်-
လော့ဂရစ်သမ်ကြီးထွားမှုအဆင့်တွင် ဘက်တီးရီးယားများမှ အရည်အသွေးမြင့် မျိုးဗီဇ DNA ကို လျင်မြန်စွာ သန့်စင်ပါ။
◮RNase ညစ်ညမ်းမှု မရှိပါ-အစုံလိုက်မှ ပံ့ပိုးပေးသော DNA-Only Column သည် စမ်းသပ်မှုအတွင်း RNase ကို မထည့်ဘဲ မျိုးရိုးဗီဇ DNA မှ RNA ကို ဖယ်ရှားနိုင်စေပြီး ဓာတ်ခွဲခန်းအား exogenous RNase မှ ညစ်ညမ်းခြင်းမှ ကာကွယ်ပေးပါသည်။
◮မြန်သောအမြန်နှုန်း-Foregene Protease သည် အလားတူ ပရိုတိန်းများထက် လုပ်ဆောင်ချက် ပိုမိုမြင့်မားပြီး တစ်ရှူးနမူနာများကို လျင်မြန်စွာ ချေဖျက်ပေးသည်။လုပ်ဆောင်ချက်သည် ရိုးရှင်းပြီး မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူသည့် လုပ်ဆောင်ချက်ကို မိနစ် 20 မှ 80 အတွင်း ပြီးမြောက်နိုင်သည်။
◮အဆင်ပြေသည်-အာရုံစူးစိုက်မှုအား အခန်းအပူချိန်တွင် လုပ်ဆောင်ပြီး 4°C အပူချိန်နိမ့်သော အာရုံစူးစိုက်မှု သို့မဟုတ် DNA ၏ အီသနောမိုးရွာသွန်းမှုအတွက် မလိုအပ်ပါ။
◮ဘေးကင်းရေး-အော်ဂဲနစ် ဓာတ်ပစ္စည်းများ ထုတ်ယူရန် မလိုအပ်ပါ။
◮အရည်အသွေးမြင့်မားသော:ထုတ်ယူထားသော မျိုးရိုးဗီဇ DNA တွင် ကြီးမားသောအပိုင်းအစများ၊ RNA မရှိ၊ RNase မရှိ၊ နှင့် အိုင်းယွန်းပါဝင်မှု အလွန်နည်းပါးပြီး စမ်းသပ်မှုအမျိုးမျိုး၏ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။
◮Micro-elution စနစ်-၎င်းသည် ရေအောက်ပိုင်း ရှာဖွေတွေ့ရှိခြင်း သို့မဟုတ် စမ်းသပ်မှုများအတွက် အဆင်ပြေသည့် မျိုးဗီဇ DNA ၏ အာရုံစူးစိုက်မှုကို တိုးမြှင့်နိုင်သည်။
ဖော်ပြချက်
ဤကိရိယာသည် အရင်းအမြစ်အမျိုးမျိုးမှ ဘက်တီးရီးယားများ၏ ယဉ်ကျေးမှုများ (Gram-negative and Gram-positive) မှ မျိုးဗီဇ DNA ထုတ်ယူရန် လွယ်ကူမြန်ဆန်သောနည်းလမ်းကို ပံ့ပိုးပေးပါသည်။လော့ဂရစ်သမ် ကြီးထွားမှုအဆင့် (1×109 ဘက်တီးရီးယား) တွင် ဘက်တီးရီးယား ယဉ်ကျေးမှု 3ml ထက်နည်းသော လုပ်ငန်းစဉ်ကို လုပ်ဆောင်နိုင်သည်။ကိရိယာကို ၁ နာရီအတွင်း အရည်အသွေးမြင့် genomic DNA 15-50μg ထုတ်ယူနိုင်စေသည့် စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် Foregene Protease နှင့် တွဲဖက်ထားသည်။ထို့အပြင်၊ ထိုကိရိယာသည် plasmids၊ Cosmid၊ BAC ကဲ့သို့သော genome မှလွဲ၍ အခြားသော မျိုးဗီဇပစ္စည်းများကိုလည်း ထုတ်ယူနိုင်သည်။
လှည့်ကွက်ကော်လံတွင်အသုံးပြုသည့် DNA တစ်ခုတည်းသော စီလီကာဂျယ်မက်ထရစ်ပစ္စည်းသည် ကုမ္ပဏီ၏ထူးခြားသောပစ္စည်းအသစ်ဖြစ်ပြီး DNA ကို ထိထိရောက်ရောက်နှင့် အထူးအားဖြင့် စုပ်ယူနိုင်သည်။DNA အတွက် အမြင့်ဆုံး စုပ်ယူနိုင်စွမ်းမှာ 80μg ဖြစ်သည်။ထူးခြားသောကြားခံနှင့် ဖယ်ထုတ်ခြင်းစနစ်သည် ဆဲလ်များရှိ RNA၊ ညစ်ညမ်းသောပရိုတင်းများ၊ အိုင်းယွန်းများနှင့် အခြားအော်ဂဲနစ်ဒြပ်ပေါင်းများကို အမြင့်ဆုံးဖယ်ရှားပေးနိုင်သည်။ထုတ်ယူထားသော မျိုးရိုးဗီဇ DNA အပိုင်းအစသည် ကြီးမားပြီး၊ မြင့်မားသော သန့်ရှင်းမှု၊ တည်ငြိမ်ပြီး ယုံကြည်စိတ်ချရသော အရည်အသွေးရှိပြီး DNA အပိုင်းအစ၏ အရွယ်အစားသည် 23kb ခန့်တွင် တည်ငြိမ်သည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၅၀၊ ကြိုတင်ပြင်ဆင်မှု ၁၀၀၊ ပြင်ဆင်မှု ၂၅၀
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
| ကြားခံ ML1 |
| ကြားခံ ML2 |
| Buffer PW |
| ကြားခံ WB |
| ကြားခံ EB |
| Foregene Protease |
| Lysozyme |
| ကြားခံ TE |
| DNA သီးသန့်ကော်လံ |
| ညွှန်ကြားချက်များ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
- RNase ညစ်ညမ်းမှုမရှိခြင်း- မျိုးရိုးဗီဇ DNA တွင် RNA ကိုဖယ်ရှားရန် RNase ပေါင်းထည့်ရန်မလိုအပ်ဘဲ၊ ဓာတ်ခွဲခန်းတွင် exogenous RNase ဖြင့်ညစ်ညမ်းခြင်းမှရှောင်ကြဉ်ပါ။
- မြန်ဆန်သော မြန်နှုန်း- Foregene Protease သည် အလားတူ ပရိုတင်းများထက် လုပ်ဆောင်ချက် ပိုမိုမြင့်မားပြီး ကျိုးသွားသော ဘက်တီးရီးယား နမူနာများကို အချိန်တိုအတွင်း ချေဖျက်နိုင်သည်။
- အဆင်ပြေမှု- အခန်းတွင်း အပူချိန်တွင် ဗဟိုချုပ်ကိုင်မှုကို လုပ်ဆောင်ပြီး DNA ၏ အီသနော မိုးရွာသွန်းမှု 4°C အပူချိန်နိမ့်ရန် မလိုအပ်ပါ။
- လုံခြုံစိတ်ချရမှု- အော်ဂဲနစ်ဓာတ်ပစ္စည်းများထုတ်ယူရန်မလိုအပ်ပါ။
- အရည်အသွေးမြင့်- ထုတ်ယူထားသော မျိုးရိုးဗီဇ DNA အပိုင်းအစများသည် ကြီးမားသည်၊ RNA မရှိ၊ RNase မရှိ၊ နှင့် စမ်းသပ်မှုအမျိုးမျိုး၏ လိုအပ်ချက်များကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည့် အလွန်နည်းသော အိုင်းယွန်းပါဝင်မှု။
Kit လျှောက်လွှာ
ဤကိရိယာသည် အောက်ပါနမူနာများ၏ မျိုးဗီဇ DNA သန့်စင်ရန်အတွက် သင့်လျော်သည်- လော့ဂရစ်သမ်ကြီးထွားမှုအဆင့်ရှိ ဂရမ်-အနုတ်ဘက်တီးရီးယားနှင့် ဂရမ်-အပြုသဘော ဘက်တီးရီးယားများ။
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
- ဤကိရိယာကို အခန်းအပူချိန် (၁၅-၂၅ ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်တွင်) ခြောက်သွေ့သောအခြေအနေအောက်တွင် ၁၂ လကြာ သိမ်းဆည်းထားနိုင်သည်။အချိန်ပိုကြာအောင် သိမ်းဆည်းလိုပါက 2-8°C တွင် သိမ်းဆည်းနိုင်သည်။
မှတ်ချက်- အပူချိန်နိမ့်သောနေရာတွင် သိမ်းဆည်းထားပါက၊ အဆိုပါဖြေရှင်းချက်သည် မိုးရွာနိုင်ခြေရှိသည်။အသုံးမပြုမီ၊ အခန်းအပူချိန်တွင် အချိန်အတိုင်းအတာတစ်ခုအထိ ဖြေရှင်းချက်ထည့်ရန် သေချာပါစေ။လိုအပ်ပါက မိုးရေပျော်စေရန် 37°C ရေချိုးခန်းတွင် ၁၀ မိနစ်ခန့် ကြိုတင်အပူပေးပြီး အသုံးမပြုမီ ရောမွှေပါ။
-Foregene Protease ဖြေရှင်းချက်တွင် အခန်းအပူချိန်တွင် အချိန်ကြာမြင့်စွာ သိမ်းဆည်းထားသည့်အခါတွင် ထူးခြားသော ဖော်မြူလာတစ်ခုပါရှိသည်။4°C တွင် သိမ်းဆည်းသောအခါ ၎င်း၏ လုပ်ဆောင်ချက်နှင့် တည်ငြိမ်မှု ပိုကောင်းလာမည်ဖြစ်၍ ၎င်းကို 4°C တွင် သိမ်းဆည်းထားရန် အကြံပြုထားပြီး ၎င်းကို -20°C တွင် မထားရန် မမေ့ပါနှင့်။
-Lysozyme သည် ခြောက်သွေ့သောအမှုန့်ဖြစ်ပြီး 2-8°C တွင် အချိန်ကြာမြင့်စွာ သိမ်းဆည်းထားသောအခါ (၃လ) တက်ကြွသည်။ကြာရှည်သိုလှောင်ရန်အတွက်၊ ၎င်းကို -20°C တွင်သိမ်းဆည်းပါ။
