Lnc-RT Heroᵀᴹ I(gDNase ဖြင့်)(lncRNA မှ ပထမတန်း cDNA ပေါင်းစပ်မှုအတွက် Super Premix)
သတ်မှတ်ချက်များ
25×20μl Rxns, 50×20μl Rxns
Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) သည် မျိုးရိုးဗီဇ DNA ညစ်ညမ်းမှုကို လျင်မြန်စွာဖယ်ရှားရန် lncRNA အတွက် အထူးတီထွင်ထားသည့် ပြောင်းပြန် စာသားစနစ်တစ်ခုဖြစ်သည်။5×gDNase Mix သည် 42°C တွင် 42°C တွင် RNA တွင် ကျန်ရှိသော ဂျီနိုမ်ကို လျင်မြန်စွာ ဖယ်ရှားနိုင်ပြီး qPCR ရလဒ်များအပေါ် ဂျီနိုမ်၏ အနှောင့်အယှက်ကို ထိရောက်စွာ ရှောင်ရှားနိုင်သည်။
5×L-RT HeroTM Mix တွင် Foregene LncRNA Reverse Transcriptase တွင် Foregene မှ အထူးတီထွင်ထုတ်လုပ်ထားသော Reverse Transcriptase အမျိုးအစားအသစ်ဖြစ်သည့် LncRNA နှင့် အခြားရှည်လျားသော RNA ရှုပ်ထွေးသောပုံစံပလိတ်များအတွက် အားကောင်းပြီး RNA ရင်းနှီးမှုနှင့် ပိုမိုမြင့်မားသော ပြောင်းပြန်မှတ်တမ်းတင်ခြင်းဆိုင်ရာ ထိရောက်မှုတို့နှင့်အတူ ပါဝင်ပါသည်။ပိုမိုကောင်းမွန်အောင်ပြုလုပ်ထားသောစနစ်သည် ပြောင်းပြန်ကူးယူဖော်ပြမှုနှုန်းကို ပိုမိုမြန်ဆန်စေပြီး မြင့်မားသော GC အကြောင်းအရာနှင့် ရှုပ်ထွေးသောအလယ်တန်းဖွဲ့စည်းပုံဖြင့် RNA နမူနာများကို အလွယ်တကူ ကူးယူဖော်ပြနိုင်သည်။ပထမကြိုးမျှင် cDNA ပေါင်းစပ်မှုကို 15 မိနစ်အတွင်း 42°C တွင် ပြီးမြောက်နိုင်သည်။
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
| 5× gDNase ရောနှော |
| 5× L-RT HeroTM ရောနှော |
| RNase-Free ddH2O |
| ညွှန်ကြားချက်များ |
အင်္ဂါရပ်များနှင့် အားသာချက်များ
■ပုံစံပလိတ်ရှိ gDNA ကို ၂ မိနစ်အတွင်း ဖယ်ရှားနိုင်သည့် gDNA ကို ထိရောက်စွာ ဖယ်ရှားနိုင်သည်။
■ ၎င်းသည် lncRNA ၏ စာသားပြောင်းပြန်လှန်ခြင်းကို ထိရောက်စွာလုပ်ဆောင်နိုင်သည်။ပြောင်းပြန် ကူးယူဖော်ပြခြင်း ထုတ်ကုန်ကို qPCR တွင် ထားရှိသောအခါ၊ Ct တန်ဖိုးသည် သမားရိုးကျ ပြောင်းပြန် စာသားမှတ်တမ်းစနစ်ထက် နိမ့်ပါသည်။
■ ထိရောက်သော ပြောင်းပြန်စာသားမှတ်တမ်းစနစ်၊ ပထမကြိုးမျှင် cDNA ၏ပေါင်းစပ်မှုကို အပြီးသတ်ရန် 15 မိနစ်သာကြာသည်။
■ ရှုပ်ထွေးသော နမူနာပုံစံများ- မြင့်မားသော GC အကြောင်းအရာများနှင့် ရှုပ်ထွေးသော ဆင့်ပွားတည်ဆောက်ပုံပါရှိသော တင်းပလိတ်များကို စွမ်းဆောင်ရည်မြင့်မားစွာဖြင့် ပြောင်းပြန်လှန်နိုင်သည်။
■ High-sensitivity ပြောင်းပြန် စာသားမှတ်တမ်းစနစ်၊ pg အဆင့် နမူနာများသည် အရည်အသွေးမြင့် cDNA ကို ရရှိနိုင်သည်။
■ ပြောင်းပြန်စာသားစနစ်သည် မြင့်မားသောအပူတည်ငြိမ်မှုရှိပြီး အကောင်းဆုံးတုံ့ပြန်မှုအပူချိန်မှာ 42 ဖြစ်သည်။℃၊ ၎င်းသည် 50 တွင် ကောင်းမွန်သော ပြောင်းပြန် စာသားမှတ်တမ်း စွမ်းဆောင်ရည် ရှိပါသေးသည်။℃.
Kit လျှောက်လွှာ
lncRNA နှိုင်းရအရေအတွက် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
lncRNA အကြွင်းမဲ့ အရေအတွက် ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်း။
၎င်းသည် RNA ဗိုင်းရပ်စ်ကဲ့သို့သော ခြေရာခံ RNA ကို လျင်မြန်တိကျစွာ ပိုင်းခြားစိတ်ဖြာနိုင်သည်။
မြင့်မားသော GC အကြောင်းအရာ သို့မဟုတ် ရှုပ်ထွေးသော အလယ်တန်းဖွဲ့စည်းပုံပါရှိသော RNA နမူနာများကို ပြောင်းပြန်ကူးယူခြင်း။
လုပ်ငန်းအသွားအလာ
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
ပစ္စည်းအစုံကို -20 တွင်သိမ်းဆည်းထားသင့်သည်။°C. ထုတ်ကုန်ကို အပူချိန် -20 တွင် အဆက်မပြတ် ရေခဲသေတ္တာထဲတွင် သိမ်းဆည်းပါ။°C လက်ခံပြီးပြီးချင်း။သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ သင့်လျော်ပါက၊ ထုတ်ကုန်သည် သက်တမ်း ၁ နှစ်တာကာလအတွင်း မည်သည့်စွမ်းဆောင်ရည်ကိုမျှ ကျဆင်းစေမည်မဟုတ်ပါ။
ပြဿနာခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းလမ်းညွှန်
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-သီးခြားအသံချဲ့စက်
1. ကျိုးကြောင်းဆီလျော်မှုမရှိသော primer ဒီဇိုင်း
အကြံပြုချက်- primer ဒီဇိုင်းမူများနှင့်အညီ primer ကိုဒီဇိုင်းရေးဆွဲပါ။
2. Genome အကြွင်းအကျန်များ။
အကြံပြုချက်- gDNA ဖယ်ရှားခြင်း၏ ပထမအဆင့် အပူချိန်သည် 42 ဒီဂရီစင်တီဂရိတ်ဖြစ်ပြီး တုံ့ပြန်မှုအချိန်ကို 5 မိနစ်အထိ တိုးမြှင့်နိုင်ကြောင်း သေချာပါစေ။
RT-qPCR ၏ ချဲ့ထွင်မှုအချက်ပြမှု မရှိပါ။
1. RNA သည် ဆုတ်ယုတ်သွားသည်။
အကြံပြုချက်- RNA ထုတ်ယူမှုအတွက် ပစ္စည်းကို တတ်နိုင်သမျှ လတ်လတ်ဆတ်ဆတ်ဖြစ်သင့်ပြီး အရည်အသွေးမြင့်ပြီး သန့်ရှင်းစင်ကြယ်သော RNA ကို အသုံးပြုသင့်သည်။
2. RNA တွင် inhibitors များပါရှိသည်။
အကြံပြုချက်- Reverse transcription inhibitors များသည် ယေဘူယျအားဖြင့် SDS၊ guanidine ဆားများ၊ EDTA စသည်တို့ ပါဝင်ပါသည်။ inhibitors များကိုဖယ်ရှားရန်အတွက် RNA precipitate ကို 70% Ethanol ဖြင့် ဆေးကြောရန် အကြံပြုထားပါသည်။
3. Primer ဒီဇိုင်းပြဿနာများ။
အကြံပြုချက်- primer ဒီဇိုင်းမူအရ၊ စစ်ဆေးရန်အတွက် primer ကို ပြန်လည်ဒီဇိုင်းဆွဲပါ။
ပစ်မှတ်အုပ်စုသည် ထိန်းချုပ်မှုအလွတ်တွင် ပေါ်လာသည်။
1. လည်ပတ်ကိရိယာများ သို့မဟုတ် ဓာတ်ပစ္စည်းများ ညစ်ညမ်းခြင်း။
အကြံပြုချက်- စမ်းသပ်မှုအတွက် ဓာတ်ကူပစ္စည်း သို့မဟုတ် စက်ကိရိယာအားလုံး autoclaved ဖြစ်သင့်သည်။DNA နမူနာများကို pipette ထဲသို့ စုပ်ယူခြင်း သို့မဟုတ် centrifuge ပြွန်မှ ယိုဖိတ်ခြင်းမှ ကာကွယ်ရန် ကိုင်တွယ်ရာတွင် သတိနှင့် ညင်သာစွာ ကိုင်တွယ်ပါ။
2. PCR တုံ့ပြန်မှုစနစ်ပြင်ဆင်မှုအတွင်း ညစ်ညမ်းမှုဖြစ်ပေါ်ခဲ့သည်။
အကြံပြုချက်- ဇကာ အကြံပြုချက်များကို အသုံးပြု၍ စေးလက်အိတ်များ ဝတ်ဆင်ခြင်းကဲ့သို့သော ကိုင်တွယ်ရာတွင် လိုအပ်သောသတိထားပါ။ညစ်ညမ်းမှုဒဏ်ခံစနစ်တွင် Real Time PCR Mix ကိုသုံးပါ။
3. Primers များသည် ပျက်စီးယိုယွင်းသွားသည်။
အကြံပြုချက်- primer များ ပျက်စီးသွားခြင်း ရှိ၊ မရှိ သိရှိရန် SDS-PAGE electrophoresis ကို အသုံးပြုပြီး fluorescence သိရှိခြင်း စမ်းသပ်မှုများအတွက် primers အသစ်များဖြင့် အစားထိုးပါ။
ညွှန်ကြားချက်လက်စွဲ-
