တိုက်ရိုက် RT-qPCR Kit II
Kit ဖော်ပြချက်-
◮Foregene မှထူးခြားသောတုံ့ပြန်မှုကြားခံဖြင့်ဖန်တီးထားသော Foreasy Reverse Transcriptase နှင့် Foreasy HS Taq DNA Polymerase တို့ကိုအသုံးပြု၍ တိုက်ရိုက် RT-qPCR Kit သည် ဤကိရိယာအား ပြင်းထန်သောခုခံမှုနှင့်လိုက်ဖက်ညီမှုရှိစေပြီး၊ ၎င်းသည် Foregene Lysis စနစ်အား နမူနာပုံစံအဖြစ် အသုံးပြု၍ တုံ့ပြန်မှုကိုတိုက်ရိုက်စမ်းသပ်နိုင်သည်။ဤကိရိယာသည် COVID-19 နျူကလိစ်အက်ဆစ် ထောက်လှမ်းသည့်ကိရိယာနှင့် အခြားရောဂါဖြစ်စေနိုင်သော ဘက်တီးရီးယားများအတွက် နျူကလိခ်အက်ဆစ် ထောက်လှမ်းမှုကိရိယာ တီထွင်မှုအတွက် လျှောက်ထားနိုင်သည်။
ဖော်ပြချက်
တိုက်ရိုက် RT-qPCR Kit သည် သီးခြားစီထုပ်ပိုးထားသော RT-qPCR ကြားခံ၊ မြင့်မားသောထိရောက်မှုရှိသော Foreasy HS Taq DNA Polymeraseနှင့် Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV)၊ရိုးရှင်းသောအတည်ပြုချက်အတွင်း back-end kits များဖန်တီးခြင်းနှင့် system adjustment အတွက်အဆင်ပြေစေသည်။
Foregene မှထူးခြားသောတုံ့ပြန်မှုကြားခံဖြင့်ဖန်တီးထားသော Foreasy Reverse Transcriptase နှင့် Foreasy HS Taq DNA Polymerase တို့ကိုအသုံးပြု၍ တိုက်ရိုက် RT-qPCR Kit သည် ဤကိရိယာအား ပြင်းထန်သောခုခံမှုနှင့်လိုက်ဖက်ညီမှုရှိစေပြီး၊ ၎င်းသည် Foregene Lysis စနစ်အား နမူနာပုံစံအဖြစ် အသုံးပြု၍ တုံ့ပြန်မှုကိုတိုက်ရိုက်စမ်းသပ်နိုင်သည်။ဤကိရိယာသည် COVID-19 နျူကလိစ်အက်ဆစ် ထောက်လှမ်းသည့်ကိရိယာနှင့် အခြားရောဂါဖြစ်စေနိုင်သော ဘက်တီးရီးယားများအတွက် နျူကလိခ်အက်ဆစ် ထောက်လှမ်းမှုကိရိယာ တီထွင်မှုအတွက် လျှောက်ထားနိုင်သည်။
ဤကိရိယာသည် လွယ်ကူလျင်မြန်စွာ အသုံးပြု၍ IVD ထုတ်ကုန်၏ အစိတ်အပိုင်းတစ်ခုဖြစ်သည်။ထပ်မံမတည်ဆောက်ဘဲ လွယ်ကူသော အတည်ပြုချက်သာ လိုအပ်ပါသည်။
သတ်မှတ်ချက်များ
500T၊ 50,000T
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
| Kit အကြောင်းအရာများ (20 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်) | IM-05111-02 | IM-05112-02 |
| 500 T | 50,000 T | |
| Foreasy Reverse Transcriptase (200 U/μL) | 50 μL×၁ | 1 mL×၅ |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase (5 U/μL) | 100 μL×၁ | 1 mL×၁၀ |
| 2× တိုက်ရိုက် RT-qPCRကြားခံ | 1 mL ×5 | 500 mL ×1 |
| ပို့ချသည်။ | 1 | 1 |
လည်ပတ်မှုအဆင့်များ
A: ပုံစံခွက်နှင့် ဓါတ်ဆေးကို ပြင်ဆင်ပါ။
1. ပြင်ဆင်ထားသော RNA နမူနာပုံစံကို ပြင်ဆင်ပါ (Foregene Total RNA Isolation Kit series kit ကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုထားသည်) သို့မဟုတ် ကွဲအက်နေသော နမူနာထုတ်ကုန် (Foregene Lysis စနစ်)၊ တိကျသော primers (10 μM) နှင့် အခြားသက်ဆိုင်ရာ စားသုံးနိုင်သော ကိရိယာများ၊
2. 2× Direct RT-qPCR Buffer, RNase-Free ddH2O နှင့် 20× ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး (လိုအပ်ပါက) ကို ရေခဲသေတ္တာထဲတွင် ထည့်ကာ သဘာဝအတိုင်း အရည်ပျော်သွားအောင် လုပ်ပြီး ညင်သာစွာ ရောမွှေပါ။
B- RT-qPCR စနစ်ပြင်ဆင်ပါ။
တုံ့ပြန်မှုစနစ်၏ တုံ့ပြန်မှုကြားခံပမာဏ၏ ထက်ဝက်ကို ရယူပါ (ဥပမာ၊ စနစ်၏ ထုထည်သည် 20 μL ဖြစ်ပါက၊ ၎င်းသည် 10 μL 2× Direct RT-qPCR Buffer ရရှိရန် လိုအပ်သည်။). ဘို့ဆက်စပ်အင်ဇိုင်းပမာဏအဲဒါကို အကြံပြုပါတယ်။M-MLV: 10-30 U/20 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်,တက်ခ်DNA polymerase:1-2 U/20 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်ဒါက ကျွန်တော်တို့ရဲ့ အကြံပြုချက်ပါ၊ စမ်းသပ်ပြီး ချိန်ညှိသင့်တယ်။) RNA နမူနာပုံစံ၊ သီးသန့် primers နှင့် probes များကိုထည့်ကာ RNase-Free ddH ကိုထည့်ပါ။2O မှ 20 μL။RT-qPCR တုံ့ပြန်မှုစနစ်၏ သီးခြားပြင်ဆင်မှုအား အောက်ပါဇယား 1 ကို ကိုးကားနိုင်သည်။
ဇယား 1- RT-qPCR စနစ်ပြင်ဆင်ခြင်း။
| အစိတ်အပိုင်း | အတွဲ | နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှု |
| 2× တိုက်ရိုက် RT-qPCR ကြားခံ | 10 μL | 1× |
| Foreasy Reverse Transcriptase (MMLV) | 10-30 U | |
| Foreasy HS Taq DNA Polymerase | 1-2 U | |
| ရှေ့သို့ Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| ပြောင်းပြန် primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
| စူးစမ်းလေ့လာခြင်း (4 μM) | 1 μL | 200nM |
| နမူနာပုံစံ (RNA သို့မဟုတ် Lysate) | X μL | |
| 20× ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| စုစုပေါင်း အတွဲ | 20 μL |
မှတ်ချက်- Forward Primer နှင့် Reverse Primer များသည် ပစ်မှတ် gene ၏ သီးခြား primer များဖြစ်သည်။qPCR ၏စနစ်အား လက်တွေ့စမ်းသပ်မှုနှင့် PCR မော်ဒယ်များအလိုက် ချိန်ညှိနိုင်သည်။primers အများစု၏နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှုအတွက် 400nM ကိုကျွန်ုပ်တို့အကြံပြုပါသည်။ကျေးဇူးပြု၍ ပြင်ဆင်ထားသော အာရုံစူးစိုက်မှုနှင့် အကြံပြုထားသည့် နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှုနှင့်အညီ သီးခြား primers နှင့် probes များ၏ ထုထည်ကို ချိန်ညှိပါ။
1*- မတူညီသော အရေအတွက် PCR တူရိယာများအလိုက် ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး၏ သင့်လျော်သော နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှုကို ရွေးချယ်ပါ။အသုံးများသော ပမာဏ PCR တူရိယာများ၏ အကောင်းဆုံး ROX ရည်ညွှန်းဆေး၏ အာရုံစူးစိုက်မှုကို အောက်ပါဇယားတွင် ပြထားသည်။
| အရေအတွက် PCR တူရိယာများ | ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး၏ နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှု |
| ABI PRISM 7000/7300/7700/7900HT/ အဆင့်တစ်၊စသည်တို့ | 1× (ဥပမာ၊ 20 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်တွင် 1μl 20×ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး ထည့်ပါ) |
| ABI 7500၊ 7500 Fast၊ Stratagene Mx3000P၊ Mx3005P နှင့် Mx4000 စသည်တို့။ | 0.5× (ဥပမာ၊ 20 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်တွင် 0.5μl 20×ROX အကိုးအကားဆိုးဆေး ထည့်ပါ) |
| Roche PCR တူရိယာ၊ Bio-Rad PCR တူရိယာ၊ Eppendorf ပမာဏ PCR တူရိယာ စသည်တို့ | ROX Reference Dye မပါတဲ့ |
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
အစုံကို -20 ± 5 ℃တွင်သိမ်းဆည်းထားသင့်သည်။၎င်းကို -20 ℃ အပူချိန်ထိန်းရေခဲသေတ္တာတွင် ချက်ချင်းသိမ်းဆည်းသင့်သည်။သင့်လျော်သောအခြေအနေတွင် သိမ်းဆည်းပါက သက်တမ်းသည် ၂ နှစ်ဖြစ်သည်။
