တိုက်ရိုက် RT-qPCR Kit
ဖော်ပြချက်
တိုက်ရိုက် RT-qPCR Kit သည် သီးခြားစီထုပ်ပိုးထားသော RT-qPCR ကြားခံနှင့် စွမ်းဆောင်ရည်မြင့် အင်ဇိုင်းကို ပံ့ပိုးပေးသည်အရောအနှော (Taq၊ M-MLV၊ RI)၊ back-end kits နှင့် system ကိုဖန်တီးရာတွင်အဆင်ပြေစေသည်ညှိနှိုင်းမှု၊ ရိုးရှင်းသောအတည်ပြုမှုအတွင်း။
သတ်မှတ်ချက်များ
500T၊ 50,000T
Kit အစိတ်အပိုင်းများ
Kit အကြောင်းအရာများ (20 μL တုံ့ပြန်မှုစနစ်) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
500 T | 50,000 T | |
တိုက်ရိုက်အင်ဇိုင်းအရောအနှော | 500 μL×၁ | 50 mL×၁ |
2× တိုက်ရိုက် RT-qPCR ကြားခံ | 1 mL×၅ | 500 ml×၁ |
ပို့ချသည်။ | 1 | 1 |
လည်ပတ်မှုအဆင့်များ
ဓါတ်ဆေးမွမ်းမံပြင်ဆင်ခြင်းမပြုမီ၊ အစုံပါရှိ ဓာတ်ပစ္စည်းများအားလုံးကို အခန်းအပူချိန်တွင် ရောမွှေပြီး ညင်သာစွာ ရောစပ်သင့်သည်။
A: ပြင်ဆင်ပါ။ of ပုံစံခွက် နှင့် ဓါတ်ဆေး
1. ပြင်ဆင်ထားသော RNA နမူနာပုံစံကို ပြင်ဆင်ပါ (Foregene Total RNA Isolation Kit series kit ကို အသုံးပြုရန် အကြံပြုလိုသည်
2. 2× Direct RT-qPCR Buffer၊ RNase-Free ddH2O နှင့် 20× ROX ရည်ညွှန်းဆေးကို ထည့်ပါ(ဒါဆိုပါက၊'လိုအပ်သည်) ရေခဲသေတ္တာထဲတွင် သဘာဝအတိုင်း အရည်ပျော်သွားအောင် ညင်သာစွာ ရောမွှေပါ။
B: ပြင်ဆင်ပါ။ of RT-qPCR စနစ်
စားပွဲ 1 : ပြင်ဆင်ပါ။ of RT-qPCR sစနစ်
အစိတ်အပိုင်း | အတွဲ | နောက်ဆုံးအာရုံစူးစိုက်မှု |
2× တိုက်ရိုက် RT-qPCR ကြားခံ | 10 μL | 1× |
တိုက်ရိုက်အင်ဇိုင်းအရောအနှော | ၁μL | |
ရှေ့သို့ Primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
ပြောင်းပြန် primer (10 μM) | 0.8 μL | 50-900nM |
စူးစမ်းလေ့လာခြင်း (4 μM) | ၁μL | 200nM |
နမူနာပုံစံ (RNA သို့မဟုတ် Lysate) | X μL | |
20×ROX ရည်ညွှန်းဆိုးဆေး | - | 1* |
RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
စုစုပေါင်း အတွဲ | ၂၀μL |
C: သတ်မှတ် အဆိုပါ RT-qPCR တုံ့ပြန်မှု အစီအစဉ်
စားပွဲ 2 : RT-qPCR တုံ့ပြန်မှုon အစီအစဉ် ဆက်တင် (ဘို့ ဥပမာ: နှစ်ခု-အဆင့် နည်းလမ်း)
အဆင့် | အပူချိန် | အချိန် | ဟုတ်ရဲ့လား။ | အကြောင်းအရာ | |
1 | 50 ℃ | 15 မိနစ် | 1* | 1 | စာသားပြောင်းပြန် |
2 | 95 ℃ | ၁ မိနစ် | 1 | အကြို denaturation | |
3 | 95 ℃ | 10 စက္ကန့် | ၄၀-၄၅ | Denaturation | |
60 ℃ | 30 စက္ကန့် 2* | Anneal/Extension |
သိုလှောင်မှုနှင့် စင်သက်တမ်း
- ပစ္စည်းကို 20 တွင်သိမ်းဆည်းရမည်။± 5℃.သက်တမ်းသည် 12 လဖြစ်သည်။
- ထပ်ခါတလဲလဲ အေးခဲနေသော သံသရာ (<5 cycles) ကို ရှောင်ပါ။